薄层色谱法定义、分类和特点 .docxVIP

PAGE PAGE 1 薄层色谱法定义、分类和特点 薄层色谱法(thin layer chromatography，TLC)是20世纪40年月末进展起来的一种微量的 色谱分析技术，因分别是在一平面薄层上举行的，故名。1938年，Izmailor和Schraiber在显微镜载玻片上涂布氧化铝薄层，将欲分别的物质点样于薄板上，用毛细管吸取绽开剂垂直放于样点中央，绽开剂自毛细管流出，从而胜利地分别了多种植物酒精提取物中的成分。20世纪50年月，K．rehner及Miller等在前人讨论的基础上，以硅胶为吸附剂、石膏为黏合剂，将硅胶涂布于玻璃板上制成薄层，并举行物质的分别，这也是现代意义上的薄层色谱法。按照固定相的性质和分别机理的不同，TLC可分为吸附薄层法(adsorption TLC)、分配薄层法(distrIhution TLC)、离子交换薄层法(ion exchang TLC)等，其中，以吸附薄层法和分配薄层法的应用最为广泛。下面向它们的分别机理分离举行简要介绍。①吸附薄层法。把固定相(吸附剂)匀称地涂布在表面光洁的薄层板上，把待分析的试样溶液点在薄层板一端的适当位置上，这一过程称为点样，样液点称为原点。然后将薄板放在密闭的绽开槽(chamber)里，将点样端浸人适官的溶剂中，借助于薄层板上吸附剂的毛细管作用，溶剂载着被分别组分向前移动，这一过程称为绽开(development)，所用溶剂称为绽开剂(developing solvent)。绽开时，样品中各组分在固定相与绽开剂之间发生延续的吸附、解吸、再吸附、再解吸。因为固定相对不同组分的吸附能力不同，易被吸附的组分相对移动得慢，而难被吸附的组分则相对移动快，经过一段时光，当绽开剂前沿到达预定位置后，取出薄层板，吸附力不同的组分在薄层板上可形成彼此分别的斑点。假如组分为无色物质，可通过物理或化学办法显色后定位。②分配薄层法。分配薄层法以液体为固定相。液体固定相被预先附着在载体(一种多孔的化学惰性固体物质)上，然后涂布固定相制板，点样绽开，因为被分析物质各组分在固定相和绽开剂之间溶解度不同，即分配系数不同，从而被绽开剂携带移动的速度也不同，终于将不同组分分别。③离子交换薄层法。离子交换薄层法以离子交换树脂为固定相，通常将离子交换树脂粉碎成200～40O目，再涂布在玻璃、金属薄板等的表面制成薄层板，点样绽开。被测物质的各组分与离子交换树脂举行离子交换，交换能力强的组分先交换，交换能力差的组分被绽开剂带走后再交换，从而使不同组分分别。在薄层色谱中，通常用比移值(retardation factor，Rf)来表示组分在薄层板上的保留状况。原点至绽开斑点中央的距离Rf = ────────────────原点至溶剂前沿的距离若Rf=O，表示组分留在原点不动，即该组分不随绽开剂移动；若Rf=1，表示该组分不被吸附剂保留，随绽开剂迁移到溶剂前沿，故R。的大小在O～1之间。通常适于分别的R，应在0.2～0.8之间。Rf值的大小受无数因素的影响。例如，固定相的类型与含水量、薄层板的厚度、绽开剂的极性、绽开距离、点样量、绽开时光、温度、绽开槽中溶剂蒸气的饱和程度等。因为很难控制待测组分的试验条件与文献上的试验条件彻低全都，因此，在实际工作中常将试样与参考物纯品(标准品)点于同一薄层板上，于彻低相同的条件下举行操作和测定，按照测得的相对照移值(Rf,s)举行确证。原点至被测组分斑点中央的距离Rf,s = ────────────────原点至参考物斑点中央的距离从上式可知，Rf与Rf,s不同，O≤Rf≤1，而Rf,s可以大于1，也可以小于1。测定时，将被测样品与参考物同时绽开。采纳Rb举行定性，可以消退一些系统误差。TLC作为一种成熟的、应用较广泛的微量迅速检测办法，在农药残留测定中有其独特的用处。TLC既是重要的分别手段，又是定性、定量的分析办法。它的特点是：①操作便利，仪器设备容易；②分别能力强，斑点集中，样品用量少；③可在一块薄层板上同时分析几个甚至几十个样品；④分别组分保留在薄层板上，提供重复测定和核实的机会；⑤敏捷度高(最低检出量为0.01～O.1ng)，分析速度较快。上一篇：下一篇：