保健食品中皂苷类化合物检验 .docxVIP

PAGE PAGE 1 保健食品中皂苷类化合物检验 (一)主要来源皂苷(saponin)广泛存在于植物中，在百合科、薯蓣科、玄参科、豆科、远志科、五加科等植物中含量较高。许多中草药和其他植物中都含有皂苷，如人参、柴胡、远志、大豆等。皂苷结构复杂，且彼此差异较大。按皂苷元的化学结构皂苷可分为两大类：一类为甾体皂苷，多由27个碳原子所组成，主要来源于百合科、薯蓣科和玄参科；另一类为三萜皂苷，多由30个碳原子组成，主要来源于五加科、远志科、葫芦科和豆科。人参皂苷(ginsenoside )属于三萜类皂苷，是人参、西洋参和三七中的主要有效成分。主要有人参皂苷 Ra1、Ra2、Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh1、Rh2、Rh3等。黄芪皂苷(astragaloside)主要来源于豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，主要有黄芪皂苷I～Ⅷ，其中黄芪皂苷Ⅶ又称黄芪甲苷(astragaloside Ⅶ)。(二)理化性质皂苷多为白色或乳白色无定形粉末，少数为晶体，大多数皂苷分子大、不易结晶，易吸潮，具有苦味或辛辣味。皂苷分子极性较大，易溶于热水、热、中，且在中有较大的溶解度，难溶于、、等有机溶剂。皂苷能和某些试剂，如浓硫酸、、等产生色彩反应。(三)保健功能皂苷对人体的新陈代谢起着重要的生理作用。它可以抑制血清中脂类氧化，防止过氧化脂质对肝的损伤和动脉硬化，具有抗年轻的作用。某些皂苷还具有解热、冷静、抗肿瘤等活性。个别皂苷有特别的生理活性，如人参皂苷能增进DNA和蛋白质的合成，提高机体的免疫力；三七皂苷具有扩张冠状血管，降低心肌耗氧，庇护心脏的功效；远志、桔梗皂苷等有祛痰止咳的作用；柴胡皂苷有抗菌活性；大豆皂苷具有降低、抗血栓功效等。(四)分析办法频繁的有分光光度法、薄层扫描法、气相色谱法、高效液相色谱法、高效液相-质谱联使用等。分光光度法常用于总皂昔的测定；高效液相色谱法是目前检测皂苷类成分最常用的办法，检测器主要有紫外检测器、蒸发光散射检测器、荧光检测器和示差检测器。目前我国“保健食品检验与评价技术规范”推举办法有“保健食品中总皂苷的分光光度法”和“保健食品中的人参皂苷的高效液相色谱法”。二、保健食品中总皂苷检验1．原理保健食品中的总皂苷用水经超声波提取，Amberlite-XAD-2大孔树脂预柱分别净化，在酸性条件下，提取物中总皂苷与香草醛生成有色化合物，以人参皂苷Re为标准，于560nm波特长测定吸光度值，标准曲线法定量。2.分析步骤(1)样品处理：对于固体试样，称取一定量的样品，加入一定量的水，超声波提取，水定容，摇匀。对于含有乙醇的液体样品，在水浴上挥干，用水溶解残渣后，举行柱层析。非类的液体试样，可按照其浓度凹凸，稀释后取一定量举行柱层析。用内装Amberlite-XAD-2大孔树脂和少量中性氧化铝的10m1注射器作层析管。依次用70％乙醇和水洗柱，弃洗脱液。加入已处理好的样液，用水洗柱，弃洗脱液，再用70％洗脱人参皂苷，收集洗脱液，置于60℃水浴上挥干。(2)测定：吸取一定量人参皂苷Re标准溶液，低于60℃挥干溶剂后，与上述处理过的样品同时精确?????加入香草醛冰乙酸溶液和，60℃水浴上加热15分钟，冰浴冷却后，精确?????加入，摇匀，于560nm波特长测定吸光度值。3.办法解释显色时光和温度对结果均有影响，故在试验中应注重精确?????控制；因具有挥发性，加入后应立刻测定。大孔树脂是一种具有吸附速度快、挑选性好、易解吸附的高分子吸附剂。本办法选用Amberlite-XAD-2或D101大孔树脂做固相分别、净化能达到良好的效果。三、保健食品中人参皂苷检验1．原理保健食品中的人参皂苷经提取、净化处理后，采纳梯度洗脱，反相C18柱色谱分别，紫外检测器检测。按照色谱峰的保留时光定性，峰面积标准曲线法定量，可用于保健食品中人参皂苷Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd的同时定量分析。2，分析步骤(1)样品处理：对于固体试样，取片剂或胶囊内容物研成粉末，并过20目筛；精确称取一定量样品加水超声波提取，精确?????取出一定量样液，通过D-101大孔吸附树脂净化柱(大孔吸附树脂用法前先经甲醇浸泡，水洗)。先用水洗去杂质，弃去水洗脱液，然后用70％洗脱皂苷，收集甲醇溶液，水浴上蒸干，残渣用甲醇溶解并定容、离心、过滤后，举行色谱分析。对于液体试样，取一定量的试样于水浴上蒸干，残渣加水用超声波提取，余下步骤同固体试样处理。(2)测定：色谱条件为反相C18柱(250mm×4.6mm, 5 um)；检测波长：203nm；流淌相：A液为乙腈,B液为水；梯度洗脱：0～20分钟，16%A+84%B→18%A+82%B; 20～55分钟，18%A+82%B→40%A+