保健食品中黄酮类化合物检验 .docxVIP

PAGE PAGE 1 保健食品中黄酮类化合物检验 (一)主要来源黄酮类化合物(flavonoids)是以2-苯基色原酮为母核的一类物质，指两个苯环(A环、B环)之间以一个三碳链(C环)联接而成的一系列化合物，其骨架可用C6-C3-C6表示。其中C环部分可以是脂链，也可以与B环部分形成六元或五元的氧杂环。普通黄酮类化合物按照C环的结构分类，主要是以C环的氧化情况和B环所衔接的位置不同可分为：黄酮及黄酮醇类、双黄酮类、及二氢黄酮醇类、查耳酮类、黄烷醇类、花色素类、异黄酮类及其他黄酮类等。目前已知的黄酮类化合物单体已有8000多种，广泛存在于蔬菜、水果和药用植物中。许多植物的叶、皮、根和果实中都含有一定量的黄酮类化合物。保健食品中频繁的黄酮类化合物主要有：银杏素(ginkgetin),槲皮素(gnercetin)、儿茶素(catechin ),葛根素(puerarin )、大豆异黄酮(soy isoflavones)等。原花青素(procyanidins)是一大类多酚化合物的总称，是一类有着特别分子结构的生物类黄酮，由不同数目的黄烷-3-醇或黄烷-3,4-二醇聚合而成。原花青素在葡萄、可可豆、山楂、番荔枝、野草莓、银杏、花生等植物中含量丰盛。早在20世纪50年月法国科学家就发觉可以从松树皮中提取大量原花青素，其原花青素含量达85%,70年月则发觉葡萄籽提取物中原花青素含量可高达95%，是提取原花青素更好的资源。目前讨论最多的是葡萄籽和葡萄皮中的原花青素。(二)理化性质黄酮类化合物多为结晶性固体，少数为无定型粉末。因为其母核内形成交错共轭体系，并通过电子转移、重排，使共轭链延伸，因而展现不同的色彩。黄酮类化合物因分子中多具有酚羟基而显酸性。其溶解度因结构及存在状态(糖苷和苷元)不同而有很大差异。普通游离苷元不溶或难溶于水，易溶于甲醇、、等有机溶剂及稀碱水溶液中。自然?黄酮类化合物多以苷类形式存在，黄酮苷普通易溶于水、、乙醇等极性强的溶剂中，难溶或不溶于苯、等有机溶剂中。有些黄酮类化合物在紫外光照耀下产生不同色彩的荧光。黄酮类化合物能与多种金属离子，如铝离子、镁离子、铅离子或锆离子等发生协作生成有色的协作物。原花青素为白色粉末，溶于水、乙醇、甲醇、、，不溶于乙醚、、苯等，在280nm波特长有强汲取，在酸性溶液中加热可降解和氧化形成花青素(anthocyanidin),花青素亦称花色素。(三)保健功能黄酮类化合物含有多个酚羟基使其具有很强的还原性，许多黄酮类化合物已被证明有很强的清除活性氧自由基的能力，是自然?抗氧化剂。黄酮类化合物还具有抗感染、调整免疫作用；具有降血脂和总胆固醇的作用，可显然提高载脂蛋白A等抗动脉硬化成分含量；还通过抗细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、干预细胞信号转录等表现出显著的抑制肿瘤作用。(四)分析办法黄酮化合物的测定主要有紫外可见分光光度法、荧光分光光度法、气相色谱法和高效液相色谱法、高效毛细管电泳法及示波极谱法等。保健食品中总黄酮含量的测定，常用的是紫外或可见分光光度法，其操作简便、迅速。通常有两种办法，一是将样品提取液挺直在360nm波特长测定吸光度值，是目前我国“保健食品检验与评价技术规范”推举办法。二是在样品提取液中加入显色剂()后生成红色协作物，最大汲取峰向长波长移动，与芦丁标准系列比较定量。后者抗干扰能力较强，特异性好。大豆异黄酮包括游离型苷元和结合型糖苷两类共12种，大豆苷、大豆苷元、染料木素、染料木苷、大豆黄素和大豆黄苷是其中比较重要的化合物，通常采纳高效液相色谱法测定其含量。原花青素的测定普通采纳分光光度法、HPLC法、HPLC-MS等。正丁醇-盐酸法对原花青素化学结构的依靠性比较大，不相宜低聚原花青素的测定。在香草醛-硫酸法中，的加入会引起反应体系放热，从而导致原花青素的氧化分解，而使测定结果偏低。香草醛-盐酸法对原花青素的测定具有特异性，特殊是对于类物质测定效果较好，但因为葡萄籽的来源不同，因此，所用盐酸、香草醛的浓度、显色时光、温度也不同。铁盐催化分光光度法操作简便，是目前我国“保健食品检验与评价技术规范”的推举办法。二、保健食品中总黄酮检验(一)分光光度法1．原理保健食品中的总黄酮用乙醇超声波提取，聚酰胺粉吸附柱分别净化，用苯洗脱杂质后，总黄酮用甲醇洗脱，以芦丁为对比品，于360nm波特长测定吸光度值，标准曲线法比色定量。2．分析步骤称取一定量的试样，加乙醇定容，摇匀后，超声波提取。吸取上清液加聚酚胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱。先用苯洗脱杂质，然后用甲醇洗脱总黄酮，收集甲醇洗脱液，定容。于360nm波特长测定芦丁标准溶液和样品溶液的吸光度值，依据标准曲线计算样品中总黄酮的含量。3．办法解释取样前应尽可能研磨至细，才干达到较