临床应用高通量测序仪的性能评价.pdf

临床应用高通量基因测序仪的 性能评价 黄杰 非传染病诊断试剂室 中国食品药品检定研究院 报告内容 高通量测序技术发展 基因测序仪评价与产品研制 测序与NGS产品质控 题目5 测序技术发展 Sanger测序 高通量测序 单分子测序 Single Molecule Real Time Nanopore 多分子，单克隆 多分子，多克隆 单分子测序 高通量测序技术路线 乳液PCR (454 （Roche），SOLiD （Thermo Fisher），GeneReader （Qiagen），Ion Torrent （Thermo Fisher）) 在乳液PCR,片段DNA模板与dNTP、引物和DNA聚合酶包在一个油滴中。 在凝胶中进行PCR扩增，最后得到成千上万份相同的DNA序列。 固相桥式扩增 固相模版移位 (Illumina) (SOLiD Wildfire (Thermo Fisher)) 片段DNA分散到Flowcell上，与固 定的引物结合，进行桥式扩增， 片段DNA与固定的引物结合， 从而形成很多DNA簇。 PCR扩增延长引物得到第二条链。 然后部分变性，使得自由端可以 与邻近的引物结合，再次扩增， 起到放大的效果。 DNA nanoball(Complete Genomics) 片段DNA加两次接头，然后进行滚环扩增，形成一个DNA纳米球， 最后纳米球通过杂交的原理固定在阵列的flow cell。 GoodWin S, et al. Nat Rev Genet. 2016 May 国内测序仪研发制造情况 测序临床应用 公司 测序仪 发布时间 注册证时间 模式 国内测序仪研发制造情况 BGISEQ-1000、B