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超微超顺磁性纳米氧化铁标记犬口腔黏膜上皮细胞 与磁共振成像实验 周术奎1，姚婷婷2，张楷乐1，邹青松1，傅 强1 (上海交通大学附属第六人民医院，1泌尿外科，2放射科，上海市 200233) 引用本文：周术奎，姚婷婷，张楷乐，邹青松，傅强. 超微超顺磁性纳米氧化铁标记犬口腔黏膜上皮细胞与磁共振成像实验[J].中国组织工程研究，2016，20(52):7796-7802. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.52.006 ORCID: 0000-0002-6319-723X(周术奎) 文章快速阅读： 磁共振成像体外示踪超顺磁性纳米氧化铁 磁共振成像体外示踪超顺磁性纳米氧化铁标记上皮细胞 周术奎，男，1985 年生，四川省成都市人，汉族，上海交通大学医学院在读博士，医师，主要从事组织工程技术在泌尿系统中的应用研究。 周术奎，男，1985 年生，四川省成都市人，汉族，上海交通大学医学院在读博士，医师，主要从事组织工程技术在泌尿系统中的应用研究。 并列第一作者：姚婷婷，女，1986年生，上海市人，汉族，2013年上海交通大学医学院毕业，硕士，技师，主要从事放射科基础研究与临床工作。 通讯作者：傅强，教授，博士生导师，主任医师，上海交通大学附属第六人民医院泌尿外科，上海市 200233 中图分类号:R318 文献标识码:A 文章编号:2095-4344 (2016)52-07796-07 稿件接受：2016-09- 上皮细胞培养口腔黏膜上皮组织 上皮细胞培养 口腔黏膜上皮组织 比格犬 比格犬 1 1．CCK-8检测细胞毒性 2．普鲁士蓝检测细胞标记率 磁共振信号检测 磁共振信号检测 文题释义： 磁共振成像技术：原子核有自旋运动，在恒定的磁场中，自旋的原子核将绕外加磁场作回旋转动，其运动频率与所加磁场的强度成正比，如在此基础上再加一个固定频率的电磁波，并调节外加磁场的强度，使进动频率与电磁波频率相同，这时原子核进动与电磁波产生共振，叫核磁共振。核磁共振时，原子核吸收电磁波的能量，记录下的吸收曲线就是核磁共振谱。由于不同分子中原子核的化学环境不同，将会有不同的共振频率，产生不同的共振谱。记录这种波谱即可判断该原子在分子中所处的位置及相对数目，用以进行定量分析及相对分子质量的测定，并对有机化合物进行结构分析，在医学上可用于研究活体状态下生物分子的功能活动和生理代谢。 超微超顺磁性纳米氧化铁：纳米氧化铁是一种新型的无机纳米材料，当粒径<50 nm时称之为超微超顺磁性纳米氧化铁，由于其粒径很小，容易被细胞吞噬，且代谢水平缓慢，能长期存留在细胞内，在核磁下呈低信号显影，可以作为细胞示踪剂使用，国外有文献报道其示踪时间最长可以达到18周。 摘要 背景：上皮细胞是组织工程常用的种子细胞类型，但如何无创性地对其进行体内示踪仍缺乏有效手段。 目的：探讨超微超顺磁性纳米氧化铁标记犬口腔黏膜上皮细胞及其体外磁共振成像的可行性。 方法：原代培养比格犬口腔黏膜上皮细胞，分别予以0，5，10，25，50，100 mg/L超微超顺磁性纳米氧化铁联合0.75 mg/L多聚赖氨酸标记犬口腔黏膜上皮细胞，普鲁士蓝染色鉴定不同质量浓度梯度下细胞内铁表达情况，CCK-8试剂盒检测各组细胞增殖情况，确定最佳标记质量浓度。最后，将2×105个标记上皮细胞置于1 mL PBS缓冲液中重悬，行3.0 T MR T2*WI序列扫描，测量不同标记质量浓度下MRI灰度值。 结果与结论：①超微超顺磁性纳米氧化铁联合0.75 mg/L多聚赖氨酸成功标记口腔黏膜上皮细胞，普鲁士蓝染色显示细胞内存在蓝染铁颗粒，且随质量浓度增加，蓝染颗粒增加，至25 mg/L时蓝染率达到饱和；②CCK-8法检测结果表明超微超顺磁性纳米氧化铁质量浓度低于25 mg/L时，细胞增殖不受影响；③磁共振扫描显示，随着转染质量浓度增加，超微超顺磁性纳米氧化铁标记细胞磁共振信号降低；④结果表明，超微超顺磁性纳米氧化铁联合多聚赖氨酸能有效标记犬口腔黏膜细胞，且当转染质量浓度在25 mg/L以下时，不影响细胞增殖，体外磁共振成像显影良好。 关键词： 生物材料；纳米材料；超微超顺磁性纳米氧化铁；口腔上皮细胞；磁共振成像；组织工程；国家自然科学基金 主题词： 铁化合物；纳米结构；磁共振成像；上皮细胞；组织工程 基金资助： 国家自然科学基金资助项目；上海市第六人民医院院内课题(院内-1711) 缩略语： 超微超顺磁性纳米氧化铁：ultrasmall superparamagnetic iron oxid，USPIO Magnetic resonance imaging of canine oral epithelial cells