F0值无菌生产的重要概念.pdf

F 值—无菌生产的重要概念 0 1 一、制药行业对F 值的误解 0 在制药行业，尤其是在无菌制剂生产中，各 方工程、生产、质量等技术人员经常提及F0值， 但如何正确认识F 值，正确应用F0值的概念指 0 导生产工艺的制定，我认为还有相当的差距， 甚至还有误解，下面就概括以下几点，解读F0 值。 1、F 值等于8对无菌保证水平有意义吗？ 0 2 、F 与F 之间关系的认识与计算？ 0 T 3、怎样正确认识无菌保证水平？ 2 二、正确解读F0值 热对活细胞的作用 热力灭菌是研究最深、使用最广的灭菌方 式。当温度超过细胞最佳生理活动的温度范 围时，随着温度的升高，细胞代谢减缓，最 终细胞的生长及繁殖将停止。每种细胞生理 活动的温度均有一上限，一旦温度超过它的 上限，起生命作用的蛋白质、酶及核酸会被 永久性破坏，从而导致细胞发生不可逆转的 死亡。 3 热对活细胞的作用 从微观上看，不具备真正核膜结构的原核细胞 （如细菌和蓝绿藻）耐热性最强。某些嗜热性细 菌甚至可在80 ℃ 以上的高温中存活。但是，绝大 多数生长态菌在80～100 ℃下即可被迅速杀灭。 具备核膜结构的真核微生物，如真菌和原生动物， 在60～80 ℃下就可被迅速杀灭。多数病毒的耐热 较差，只有乙肝病毒 （HBV ）例外，它要在75 ℃下至少曝热3min才能被灭活。 4 热对活细胞的作用 还有一些其他类型的生物体也具有较强的耐 热性。例如，痉挛性假麻痹症的蛋白侵袭子 （Prion ）病原体，它既不属细胞型微生物也 不属病毒，需要在132 ℃下加热1h才可完全杀 灭。 5 热对活细胞的作用 在细菌中，需氧菌中的芽孢杆菌属 （Bacillus ） 和厌氧菌中的梭状芽孢杆菌属 （Clostridium ）， 也具有较强的耐热性。这些细菌的细胞能产生 内源性孢子 （芽孢）或胞间休眠体，一旦形成 这种状态，它们对热、干燥及化学消毒剂的耐 受性增强。要想杀灭这类芽孢，使之下降一个 数量级 （一个对数单位），干热灭菌的温度必 须达到100～170 ℃ ，湿热灭菌的温度在80～ 129 ℃之间。如以干热灭菌及湿热灭菌的灭菌 率L (Lethality)来计算，芽孢被杀灭困难的程度 比其生长态时增大了104～105倍。 6 热对活细胞的作用 细菌芽孢的耐热性与多种因素有关，有些 因素尚没被人们完全认识。芽孢形成时，细 菌停止生化反应，交将遗传物质包藏在芽孢 中。此过程中发生了一系列生理变化：细胞 质大量脱水，体积变小，在变小的原生质体 周围形成了一层厚壳，此过程中，还生成了 一种特殊化学物质—吡啶二羧酸或DPA(吡啶 －26－二羧酸) 。 7 热对活细胞的作用 在芽孢形成阶段，吡啶二羧酸钙能与脱氧 核糖核酸 （DNA ）以及细胞内的酶形成复合 物，从而对休眠状态的芽孢起保护作用。处 于休眠状