微生物的实验室边培养_(经典版).pptVIP

* 微生物的类群 原生生物： 原核生物: 真菌: 病毒: 如酵母菌 单细胞的动植物 如草履虫、单细胞藻类等 微生物包含了除植物界和动物界以外的所有生物 无细胞结构 真核细胞 细菌、蓝藻 原核细胞 课题1 微生物的实验室培养 1.提供营养和条件 2.防止污染 一.培养基： 微生物生存的环境和营养物质 1.基本成分： 思考：微生物“吃”什么？ 碳源、氮源、水、无机盐 ⑴碳源 无机碳源： 有机碳源： CO2、CO32-、HCO3- 牛肉膏、蛋白胨等 自养微生物 异养微生物 ⑵氮源 无机氮源： 有机氮源： NH4＋、NO3- 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 注：含CHON的有机物为异养型微生物提供碳源、氮源、能源 概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求， 配制出供其生长繁殖的营养基质。 一.培养基： 微生物生存的环境和营养物质 1.基本成分： 碳源、氮源、水、无机盐 2.特殊营养： 维生素、碱基等 （牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有） 3.pH、氧气的需求： 4.种类： 固体培养基 液体培养基 有无 凝固剂琼脂 分离 鉴定 工业 生产 化学成分： 物理性质： 天然培养基 合成培养基 培养、分离出特定的微生物 添加（或缺少）某种化学物质 选择培养基 鉴别不同种类的微生物 添加某种指示剂或化学药品 鉴别培养基 目的用途 工业生产 由天然成分配制而成， 培养基成分不明确 天然培养基 菌种分类、鉴定 由已知成分配制而成， 培养基成分明确 合成培养基 化学组成 工业生产，连续培养 不加入琼脂 液体培养基 观察微生物运动、鉴定菌种、保藏菌种等 加入琼脂较少 半固体培养基 微生物的分离、计数等 加入琼脂较多 固体培养基 物理性质 主要应用 配制特点 培养基类型 标准 牛肉膏蛋白胨培养基 是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方 H2O 定容至1000ml Nacl 5g 蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 琼脂20.0g 分析营养构成？ 5. 配制原则 ⑴目的明确： ⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当 ⑶适宜的pH值： 有机碳源 异养型： 根据微生物的种类、培养目的选择原料 自养型： 不加碳源 加入缓冲剂 细菌偏碱，真菌偏酸 （CO2碳源） 生产 科研 巴氏消毒法 耐高温需保持干燥的 物品，160～170℃ 1～2小时 接种环、接种针等 金属用具 70~75℃、30min 80℃、15min 100℃、5~6min 消毒 灭菌 定义 方法 较为温和理化方法 杀死部分有害菌体 （不包括芽孢、孢子 强烈的理化方法， 杀死所有微生物 煮沸消毒法 化学药剂 紫外线 灼烧灭菌 干热灭菌 酒精、氯气、石炭酸等 高压蒸汽灭菌 培养基， 100KPa、 121℃、15～30min 二.无菌技术： 防止外来杂菌的污染 1.消毒与灭菌： 请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手 练习:说出无菌技术及相应的具体方法 工作台 操作者的手、衣着 培养基 培养皿 玻棒、 试管 接种环 牛奶 无菌水 饮用水 纱布 涂布器 2.无菌范围： 实验操作空间消毒 操作者的手、衣着消毒 实验用具灭菌 实验操作过程 二.无菌技术： 防止外来杂菌的污染 1.消毒与灭菌： 酒精灯旁操作 超净工作台 单个 或少数菌体 2.特征： 大小、形状、光泽度、 颜色、透明度等。 3.功能： 1.定义： 三.菌落 鉴定菌种的重要依据 固体培养基上 大量繁殖 子细胞群体 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方 H2O 定容至1000ml Nacl 5g 蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 琼脂20.0g 四.大肠杆菌的纯化培养： ㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1.计算： 培养基用量 依配方计算各成分的用量 2.称量： 3.溶化： 牛肉膏黏稠，用称量纸称取 牛肉膏、蛋白胨易吸潮，要快、加盖 牛肉膏、称量纸 、少量水加热溶解 →取纸 →蛋白胨、NaCl →琼脂 →补水定容 4.调pH、分装、封口： 5.灭菌： 6.倒平板： 培养基、培养皿 分散成单个细胞, 形成单个菌落 倒平板