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微生物检验规程―2016
修改内容：
1、2.4.1 好氧培养
将适用范围的NBB-B 培养基检测啤酒有害菌改为NBB-B 培养基设备表面擦拭。
2、3.1.2.8 空瓶
修改空瓶检测方法及结果报告
3、1.2 （11）
将超净工作台用PCA 暴露15min 改为用PCA 暴露30min
取消内容：
所有的平板接种方法由原来的接种1ml 或5ml 全部改为接种1ml，取消5ml 接种。
增加内容：
1、增加3.2.2.6.2.1 卡氏罐（扩培液）、种子罐（扩培液）、扩培罐（扩培液）和发酵液（满罐后1～2 天取
样）NBB-B 接种方法：将底部沉淀摇匀后用无菌吸管吸取0.5ml 于装有10～20ml NBB－B 培养基的试管中27℃
厌氧培养。
2、增加3.2.2.15 细菌菌落死灭温度的测定方法。
本标准替代《微生物检验规程-2015》及之前所有版本，自本标准生效之日起，《微生物检验规程-2015》
及前所有版本作废。
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微生物检验规程
目录
1 微生物实验室的基本要求5
1.1 微生物实验室守则5
1.2 无菌室要求 5
1.3 无菌试验操作要点6
2 基本操作技术 7
2.1 玻璃器皿的洗涤（见《理化基础检验规程》2） 7
2.2 灭菌方法 7
2.2.1 火焰灭菌 7
2.2.2 干热灭菌：8
2.2.3 高压蒸汽灭菌8
2.2.4 紫外灯杀菌8
2.3 接种方法9
2.3.1 倒平板法9
2.3.2 微膜过滤 11
2.4 培养方法 12
2.4.1 好氧培养 12
2.4.2 厌氧培养 12
2.5 显微镜 13
2.5.1 显微镜的使用 13
2.5.2 显微镜的保养 13
3 检验程序和方法 14
3.1 取样 14
3.1.1 取样的要求 14
3.1.2 取样方法 14
3.1.2.1 自来水及酿造用水 14
3.1.2.2 CIP 最后冲洗水 14
3.1.2.3 含氯的水 15
3.1.2.4 密闭容器 15
3.1.2.5 板框式取样 15
3.1.2.6 气源 16
3.1.2.7 空间空气 17
3.1.2.8 空瓶 18
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微生物检验规程
3.1.2.9 擦拭类样品 18
3.1.2.10 固体物质 18
3.1.2.11 非微生物分析用样品 18
3.2 样品的处理及分析 19
3.2.1 样品的处理 19
3.2.2 分析项目及方法 19
3.2.2.1 细菌总数 19
3.2.2.2 大肠菌群20
3.2.2.2.1 啤酒大肠菌群 20
3.2.2.2.2 水样大肠菌群 （见GB/T 5750.12—2006）22
3.2.2.3 好氧菌（醋酸菌等） 22
3.2.2.4 啤酒酵母 23
3.2.2.5 酵母属野生酵母 23
3.2.2.6 厌氧菌(乳酸菌等) 23
3.2.2.6.1 R-R 或NBB-A 培养基23
3.2.2.6.2 NBB-B 培养基23
3.2.2.7 沙门氏菌（见GB4789.4） 24
3.2.2.8 金黄色葡萄球菌（见GB4789.10）24
3.2.2.9 啤酒酵母细胞数的测定——血球计数板法 24
3.2.2.10 酵母活性的测定——亚甲基蓝染色法（美兰染色法）25
3.2.2.11 酵母泥浓度25
3.2.2.12 麦汁的微生物稳定性26
3.2.2.13 瓶装啤酒的货架寿命 27
3.2.2.14 桶、罐装啤酒的货架寿命 27
3.2.2.15 细菌菌落死灭温度的测定 28
3.3 检测各样品所用培养基术语解释及培养条件28
3.4 啤酒生产各样品的检测项目及方法 30
3.5 观察结果及鉴别 31
3.6 KOH 和过氧化氢酶活性试验33
3.6.1 KOH-试验 33
3.6.2 过氧化氢酶活性试验34
3.7 结果报告34
4 微生
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