GB 4789.15-2016食品安全国家标准　食品微生物学检验　霉菌和酵母计数.pdf

GB4789.15-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验霉菌和酵母计数 定义 • 霉菌：霉菌是丝状真菌的俗称，意即“发霉 的真菌” ，它们往往能形成分枝繁茂的菌丝 体。 • 酵母：是一种单细胞真菌，在有氧和无氧 环境下都能生存。 修改情况 • 本标准所代替标准： – GB 4789.15-2010 – SN/T 2552.3-2010 《乳与乳制品卫生微生物学检验 方法第3部分：酵母、霉菌菌落计数方法》。 • 本标准与GB 4789.15-2010 相比，主要修改如 下： —修改了设备和材料； —修改了培养基和试剂； —修改了检验程序和操作步骤； —修改了结果与报告； —修改了附录A 。 —附录B修改为第二法 —修改了设备和材料 • 将均质器的名称具体为：拍击式均质器或 均质袋 （2.2 ） – 以前的版本都是采用震荡的方法来进行样品表 面的冲洗，均质不够，另外有些实验室，使用 的是旋转刀均质器，可能会把霉菌的菌丝切断。 所以本次修订对均质方式进行了明确的规定。 • 无菌试管规格由10mmX75mm修改为 18mmX180mm （2.6 ） – 规定成粗大的试管，有利于进行样品稀释液的 混匀，否则在小试管里面很难充分混匀。 • 增加了微量移液器及枪头1.0mL （2.11 ） – 这是为了包容实际工作中常用的方式。 • 删除了无菌广口瓶：500 mL – 均质方式改变后，现在实验室基本都不用。 • 删除了冰箱和恒温震荡器。增加了漩涡混 合仪。增加了恒温水浴 – 删除了冰箱和恒温震荡器，因为标准没有用到。 增加了漩涡混合仪，主要是如果要求反复的吹 吸样品稀释液，容易导致形成有害气溶胶，并 增加污染机会，用漩涡混合仪可以来保证样品 稀释液的均匀，减少污染。增加了恒温水浴， 主要为了准确控制倾注琼脂的温度。 修改了培养基和试剂 • 增加了生理盐水(A.1)和磷酸盐缓冲液(A.4) – 经过验证，和蒸馏水稀释液结果没有差异。方 便于工作，同一份样品，需要做菌落总数、大 肠菌群和霉菌。 • 修改了马铃薯葡萄糖琼脂和孟加拉红琼脂 的灭菌时间 （A.2.2 、A.3.2 ） – 2010版中二者的灭菌时间均为20min，2016版 将时间缩短为15min。太长时间的高压灭菌可 能会破坏糖类。 • 修改了倾注平板的步骤 （5.1.6 ） – 2010版在倾注平板前，有用少量乙醇溶解氯霉 素加入培养基中的步骤，在2016版中已将此部 分内容删除。氯霉素能够耐高压灭菌，所以可 以直接加入培养基中灭菌。 修改了检验程序和操作步骤 • 2010版中只有无菌蒸馏水作为稀释液，而 在2016版中增加了生理盐水及磷酸盐缓冲 液。 – 两种稀释液经过试验验证结果和蒸馏水没有差 异； – 方便工作，同一份样品，需要做菌落总数、大 肠菌群和霉菌的，重新称重换稀释液的话，增 大实验室工作量。 • 将平皿中马铃薯葡萄糖琼脂和孟加拉红琼 脂培养基的使用量由15mL~20mL改为 20mL~25mL 。 – 符合国标GB 4789.28-2013版对于培养时间超过 48小时的培养基应倾注四毫米左右的厚度和二 十毫升以上量的相应规定。 – 培养时间长，培养基会失水，对真菌生长有影 响。 • 增加了平板正置培养的规定？ – 正置培养是避免在反复观察的过程中，上下颠 倒平板导致霉菌孢子扩散形成次生小菌落的一 种手段。 • 霉菌蔓延生长覆盖整个平板