干细胞基因OCT4过表达对胃癌细胞侵袭迁移的影响研究.pdfVIP

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2017-07-02 发布于上海
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干细胞基因OCT4过表达对胃癌细胞侵袭迁移的影响研究.pdf

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干细胞基因OCT4过表达对胃癌细胞侵袭迁移的影响研究

目录英文缩略词 1 中文摘要2 ABSTRACT 3 第一章前言5 第二章实验材料与方法7 一、材料7 1.细胞株来源7 2.质粒来源7 3.主要仪器和设备7 4.主要试剂9 5.主要试剂的配制 11 二、实验方法 13 1.细胞培养 13 2.慢病毒包装 14 3. 慢病毒生物学滴度测定 15 4. 慢病毒感染 SGC7901 并构建稳转株 SGC7901-hOCT4 、稳转株 SGC7901-ZPP 15 5.半定量RT-PCR 鉴定稳转细胞株SGC7901-hOCT4 。 16 6.MTS 实验检测细胞增殖能力 18 7.细胞划痕实验 19 8. 胃癌细胞的侵袭性实验 19 9. 胃癌细胞的迁移实验。20 10.荧光定量PCR 20 11.细胞免疫组化检测OCT4、Sox2、β-catenin、Wnt3 在SGC7901、稳转株SGC7901-hOCT4 、稳转株SGC7901-ZPP 表达情况。23 12. Western Blot 实验24 13.胃癌细胞的成瘤实验26 14.统计学方法27 第三章 .实验结果及分析28 一、慢病毒包装及滴度测定结果28 二、慢病毒转染 SGC7901 、感染效率的评价及构建稳转细胞稳转株 SGC7901-hOCT4 、稳转株SGC7901-ZPP 。28 三、MTS 检测过表达OCT4 对胃癌细胞的增殖影响。31 四、Transwell 细胞侵袭实验32 五、Transwell 细胞迁移实验32 六、细胞划痕实验33 七、荧光定量PCR 34 八、细胞形态观察36 九、细胞免疫组化检测过表达OCT4 的胃癌细胞7901 中Sox2、β-catenin、 Wnt3 表达情况37 十、Western Bolt 结果38 十一、胃癌细胞的裸鼠成瘤实验。38 第四章讨论40 第五章结论43 参考文献44 致谢48 综述49 万方数据英文缩略词英文简称英文全称中文全称 O