山豆根配方颗粒质量及相关药效学实验分析研究.pdf

目 录 中文摘要 1 英文摘要 3 引 言 5 正 文 7 第一部分 山豆根配方颗粒定性及相关指标检查实验 7 1 实验材料与仪器 7 1.1 实验材料 7 1.2 实验仪器 8 2 山豆根配方颗粒薄层分析 8 2.1 方法与结果 8 2.1.1 样品制备 8 2.1.2 实验方法 8 2.1.3 实验结果 9 3 山豆根配方颗粒红外光谱分析 9 3.1 样品制备及测定方法 9 3.2 实验结果 9 4 山豆根配方颗粒相关质量指标检查 11 4.1 粒度检查及结果 11 4.2 水分检查及结果 12 4.3 溶化性检查及结果 12 5 总结 13 第二部分 山豆根配方颗粒定量分析实验 14 1 仪器与材料 14 1.1 仪器 14 1.2 试剂与材料 14 2 提取条件优化 15 2.1.单因素考察 15 2.1.1 提取时间 15 2.1.2 溶剂用量 15 2.1.3 氨液用量 16 2.1.4 溶剂选择 16 2.2 正交试验 17 2.3 小结 19 3 HPLC 法测定山豆根配方颗粒中苦参碱含量 19 3.1 色谱条件优化 19 3.1.2 离子强度选定 20 3.1.3 洗脱比例选定 21 3.1.4 缓冲盐pH 值选定 22 3.1.5 小结 23 3.2 方法与结果 23 3.2.1 色谱条件 23 3.2.2 对照品溶液制备 24 3.2.3 供试品溶液制备 24 3.2.4 方法学考察 24 3.2.4.1 标准曲线的制备 24 3.2.4.2 精密度试验 25 3.2.4.3 稳定性试验 25 3.2.4.4 重复性实验 25 3.2.4.5 回收率试验 26 3.3 样品测定 26 3.4 小结 28 4 酸性染料比色法测定山豆根配方颗粒中总生物碱含量 28 4.1 对照品及样品制备 28 4.1.1 对照品溶液制备 28 4.1.2 供试品溶液制备 28 4.2 缓冲液及显色剂配制 28 4.2.1 缓冲液配制 28 4.2.2 显色剂配制 29 4.3 测定条件的选择 29 4.3.1 缓冲液pH 值的选择 29 4.3.2 溴百里酚蓝溶液加入量的选择 29 4.3.3 最大吸收波长的确定 29 4.3.4 小结 30 4.4 方法学考察 30 4.4.1 线性关系考察 30 4.4.2 精密度试验 31 4.4.3 稳定性试验 32 4.4.4 重复性试验 32 4.4.5 加样回收率试验 32 4.5 样品测定 33 4.6 小结 33 5 总结 34 第三部分 山豆根配方颗粒及其饮片药效学研究 35 1 山豆根配方颗粒及其饮片毒性实验 35 1.1 试剂与材料 35 1.2 样品制备 35 1.3 实验内容 35 1.3.1 山豆根饮片急性毒性实验 35 1.3.2 山豆根配方颗粒急性毒性实验 37 1.4 小结 37 2 山豆根配方颗粒及其饮片抗肿瘤实验 37 2.1 材料、试剂及仪器 37 2.2 样品制备 38 2.3 试验内容 38 2.3.1 肿瘤小鼠造模 38 2.3.1.1 H22 荷瘤小鼠造模 38 2.3.1.2 S180 荷瘤小鼠造模 38 2.3.2 给药方法及操作 38 2.3.3 实验结果 39 2.3.3.1 对小鼠体内抑瘤影响结果 39 2.3.3.2 对小鼠免疫器官影响结果 41 2.3.3.3 对小鼠血清TNF-α 的影响结果 43 2.3.3.4 对小鼠血清TNF-β 的影响结果 44 2.3.3.5 对小鼠血清INF-γ 的影响结果 45 2.3.3.6 对小鼠血清IL-2 的影响结果 46 2.4 小结 47 3 山豆根配方颗粒及其饮片抗炎作用实验 48 3.1 材料、试剂及仪器 48 3.2 样品制备 48 3.3 实验内容 48 3.3.1 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响结果 48 3.3.2 对角叉菜胶致小鼠足肿胀的影响结果 49 3.3.3 对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响结果 50 3.3.4 对小鼠棉球肉芽肿的影响结果 51 3.3.5 对小鼠肾上腺重量和 Vit C 含量的影响结果 52 3.3.6 对小鼠角叉菜胶炎性渗出液中PGE2 含量的影响结果 53 3.3.7 对小鼠血清中MDA 含量的影响结果 55 3.3.8 对小鼠血清NO 、NOS 含量的影响结果 55 3.3.9 对小鼠