GC-MS数据处理和定性定量分析.ppt

(二)定量方法3．内标标准曲线方法外标法存在一定缺点，限于每次的分析条件从样品处理到测试都会产生误差。为了克服不可防止的测量误差，选择适当的基准物质(内标化合物)参加标样和待测样品中进行测定，计算待测化合物和内标化合物响应值之比(称为相对响应因子)，由相对响应因子和参加内标化合物的量进行定量，称为内标法。相对响应因子计算，可由：得到式中wi——待测化合物标样含量；Ai——待测化合物标样峰面积(或峰高)；WS——内标化合物含量；As——内标化合物峰面积(或峰高)(二)定量方法当进样量、仪器响应值发生变化时，处在同一样品中的待测化合物与内标化合物的含量比值不变；它们的响应值的比值也就不变因此，内标法可以消除由于进样量、仪器响应值波动等带来的系统误差。最好在所有标样和待测样中参加内标的量相同，以防止由于内标物的浓度变化引起响应值的非线性变化所造成的偏差如果在样品前处理(如浓缩、萃取、衍生化等)之前参加内标，还可以补偿待测组分在前处理中的损失。必要时可以参加多个内标内标法的关键是内标的选择。内标化合物应该是待测样品中不存在的化合物，而其性质应尽可能和待测化合物相近，溶于样品又不起化学反响，出峰接近待测化合物．(或在它们之间)又不能相互重叠，确实不易找到(二)定量方法4、同位素稀释法最理想的是采用待测化合物的同位素标记物作为内标，可以保证内标化合物的化学性质、色谱行为、质谱行为都与待测化合物一致，这样可以消除化合物之间的差异带来的误差此法又称“同位素稀释法”同位素标记物作内标只有GC／MS联用技术可以运用，色谱其它检测器无法使用，这就是所指GC／MS联用独到之处GC/MS数据处理和定性定量分析GC/MS数据系统GC／MS联用获得的数据量非常大，信息也非常丰富，如果数据处理不当，可能丧失许多珍贵的信息。一个样品如果GC／MS得到的TIC图中有100个可鉴别的色谱峰。却可能会有上千张质谱图，因为每个色谱峰至少有3～5次扫描，色谱峰间隔也有假设干次扫描。每张质谱图都有可利用的信息GC/MS数据系统各种近代分析仪器都配备了计算机和相应的应用软件，通称为仪器的数据系统(也有称化学工作站)。GC／MS联用仪器的数据系统包括硬件和软件两个局部应具备以下功能：①控制仪器运行，包括设置气相色谱、质谱的运行参数，实时显示运行状态，如真空，压力、温度、电压参数及所运行的方法等；②采集、处理、简化、储存数据，并实时监测数据采集过程；③数据再现和处理，谱图处理、定性、定量分析、结果输出、数据传输等。数据系统的结构和功能对仪器性能的发挥及仪器操作的灵活性至关重要GC/MS数据系统目前多数仪器数据系统的硬件，包括计算机主机及显示器、键盘、打印机等根本的外围设备，一般都是通用的PC机，但是配置不同，性能差异也不小还有一个很重要的部件，即任何计算机和GC／MS仪器连接，也需要有一个“接口”，是由模数／数模转换器(A／D、D／A)、多路切换开关、实时钟还有微处理器等组成的接口电路板，放在电子部件的机箱内。它不是通用部件，不同生产厂家、不同类型仪器的接口板结构性能都不相同。它的功是将质谱检测器接收的离子流的电压信号通过A／D转换成数字信号，经微处理器采集、简化处理并储存在计算机中，这就是通常获得的谱图的原始数据文件另外，通过D／A转换将操作员从计算机键盘输入的各种参数通过A／D转换传送到相关的电路控制器，控制仪器运行，同时在显示屏上显示仪器运行状态。它关系到数据的采集、传输速率和数据的质量GC/MS数据系统数据系统的软件包括运行仪器的操作系统和各种应用程序，还有各种用途的质谱数据库。不同生产厂家、不同类型仪器的操作系统也不相同但近年来有的厂家将自家生产的不同类型仪器的操作系统逐渐统一标准化，除了控制仪器运行和数据采集功能不通用外，数据处理的功能都是通用的，并且可联网，做到资源共享GC/MS数据系统值得注意的是，计算机辅助质谱解析通用软件的开展，过去质谱数据库虽然是通用的，但是各个厂家数据系统采集的质谱数据格式不同，谱库检索的系统也不相同近年来质谱数据有了多种转换格式，一些厂家的应用软件还提供了不同质谱数据格式的转换功能，NIST的谱库检索系统已被普遍采用，最新版的NIST、软件，增加了许多应用程序，除分子量、同位素丰度、元素组成计算等根本功能外，还有谱图解析、自动鉴别质谱数据、别离GC共流出色谱峰等应用软件一、质谱图的提取质谱库检索和谱图解析都需要获得好的质谱图。质谱图的提取不仅要保证谱图的质量，还要不丧失可鉴定的组分，包括共流出组分的别离。背景扣除没有固定的要求例如：是取色谱峰顶对应的一张质谱图还是几张质谱图平均，需不需要扣除背景，是扣除前面还是后面的谱图等。主要