DB21T 3949-2024 辣椒细菌性斑点病抗病性鉴定技术规程.docx

ICS65.020.20

CCSB31 21

辽 宁 省 地 方 标 准

DB21/T3949—2024

辣椒细菌性斑点病抗病性鉴定技术规程

Technicalregulationforevaluationofpepperresistancetobacterialleafspot

2024-04-30发布 2024-05-30实施

辽宁省市场监督管理局 发布

DB21/T3949

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前 言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由辽宁省农业农村厅提出并归口。

本文件起草单位：辽宁省农业科学院、辽宁省农业发展服务中心、新民市乡村振兴发展中心、桓仁满族自治县市场监管事务服务中心、大连市现代农业生产发展服务中心、铁岭市农业科学院、喀左县老爷庙镇蔬菜技术服务站、喀左县公营子镇蔬菜站、喀左县草场乡蔬菜技术服务站、喀左县林业和草原事务服务中心、北票市农业综合行政执法队、北票市农业发展服务中心、北票市龙城区农业农村局、北票市龙潭乡林业站

本文件主要起草人：王辉、刘丽、于舒怡、邹春蕾、李柏宏、关天舒、刘长远、张曦、鲁旭鹏、宋露、郑丽娇、樊琳琳、王延安、刘震、王德峰、暴国兴、陶成东、茹威、时春利、梁健、吕丽英、杨永胜、张国辉。

本文件发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行反馈，我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。

归口管理部门通讯地址：辽宁省农业农村厅（沈阳市和平区太原北街2号），联系电话：024文件起草单位通讯地址：辽宁省农业科学院（沈阳市沈河区东陵路84号），联系电话：024

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辣椒细菌性斑点病抗病性鉴定技术规程

范围

本文件规定了辣椒细菌性斑点病[(Xanthomonascampestrispv.vesicatoria(Doidge)Dye]抗病性鉴定过程的准备、接种、调查和评价等技术内容。

本文件适用于辣椒（CapsicumannuumL.）品种或种质资源对细菌性斑点病抗性的室内鉴定及评价。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T36851 辣椒细菌性斑点病菌检疫鉴定方法

SN/T1538.1 培养基制备指南第1部分：实验室培养基制备质量保证通则

术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

准备

培养基制备

肉汁胨培养基（NA）：牛肉浸膏3.0g，酵母浸膏1.0g，蛋白胨5.0g，葡萄糖（或蔗糖）10.0g，琼脂粉10.0g，蒸馏水1000mL，pH6.8～7.0，高压灭菌121℃20min。

酵母膏葡萄糖培养基：酵母浸膏10.0g，D-葡萄糖20.0g，碳酸钙20.0g，琼脂粉10.0g，蒸馏水1000mL，除碳酸钙外，先将其他成分加热溶解，然后加碳酸钙，将pH值调到7.2，再高压灭菌121℃20min。

接种体制备

病原物分离

从发病植株叶片的典型病斑上采集病样，采用平板划线法或稀释平板法进行分离，挑取单个菌落进行纯化培养，经柯赫氏证病法则测定后，对纯化的分离物进行形态学、分子学鉴定等，确定为辣椒细菌

性斑点病病原菌，并将该病菌4℃保存备用。病原物的分离与鉴定符合GB/T36851的规定和附录A

的要求。

接种体制备

将获得的病原菌在NA平板培养基上进行纯培养，28℃恒温培养36h～48h，用接种环刮取病原菌，将其放入装有适量无菌水的三角瓶中，充分搅拌均匀，用稀释平板计数法或血球计数板计数法测定菌悬液浓度，配制成3×106cfu/mL病菌悬浮液，供接种使用。

菌种保存

斜面保存

将纯化的病原物划线转接到试管斜面培养基上，28℃恒温培养36h～48h，待病菌长满斜面后放4℃条件下冷藏保存，保存期为1周～10周。

超低温甘油保存

将获得的病原菌在NA平板培养基上培养，28℃恒温培养36h～48h，用接种环挑取病原菌放入装有灭菌的甘油（甘油:水=1:4）冻存管中混匀，放于-80℃超低温冰箱下长期保存。

鉴定对照品种选择

抗病性鉴定时选择“earl