原创力文档- 1、本文档共8页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
◼细胞融合定义
又称体细胞杂交，是指两个或多个相同或不同细胞，
通过培养和诱导，发生膜融合形成单个细胞的过程。
◼分类
同种融合：型相同的细胞进行融合；
异种融合：来自不同型的细胞进行融合；
自发融合：同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发
合并；
诱发融合：异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合。
◼诱导因素
生物方法（）
化学方法（聚乙二醇PEG）
物理方法（电激和激光）。
聚乙二醇诱导机理
◼PEG具有吸水性以及凝聚和沉淀蛋
白质的作用；
◼在不同种类的动物细胞混合液中加入聚乙
二醇，膜脂分子排列发生改变，细胞发生
凝集；在稀释和除去聚乙二醇时，质膜恢
复原有的有序结构，在恢复过程中即可诱
导相接触的细胞发生融合。
细胞计数板
细胞计数室
4
细胞浓度=(4个大格细胞数/4)×稀释倍数×10/mL
细胞计数的操作步骤
擦净细胞计数室备用
鸡红细胞悬液1mL，加4mLHank’s液，1000r/min，5分钟，
弃上清。沉淀加0.5mLHank’s液打散（原液）
取10ūl细胞原液加入990ūl生理盐水
取细胞悬液滴于有盖玻片的细胞计数板斜面上，使液体充
满计数室，计数室内有气泡时，取下盖片，重新滴加
4
细胞原液浓度=(4个大格细胞数/4)×稀释倍数×10/mL
8
计算，取10个细胞
本次实验技术路线
85mlHank’s液
10个细胞+
1000rpm，5min
弃上清，弹指法沉淀打散
1min内
37度水浴中，将1ml50%PEG加入37度
静置3min边加边轻轻摇动
缓慢滴加9mlHank’s液
37度水浴静置5min
悬起1000rpm，5min
弃上清，沉淀打散，制片观察
融合率的计算
◼融合率=融合细胞的全部核数/全部细胞核数×100%
◼在镜下随机计数200个细胞(包括融合的与未融合的细
胞)，以融合细胞(含两个或两个以上的细胞核的细胞)的细
胞核数除以总细胞核数(包括融合与未融合的细胞核)即得
出融合率。
文档评论（0）