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马铃薯脱毒与快繁技术

马铃薯简介马铃薯属茄科、茄属作物。马铃薯适应性广，单产高，营养丰富，既是一种重要的粮食作物也是一种调节市场供应的重要蔬菜。马铃薯原产于拉丁美洲。马铃薯是无性繁殖植物，病毒容易在体内积累，造成种性退化，产量降低、品质下降。茎尖组织培养为解决马铃薯病毒危害提供了有效的途径。

马铃薯为什么要脱毒呢？“种薯”是指那些作为种子用的薯块。“脱毒种薯”是指种薯经过一系列物理、化学、生物或其它技术措施清除薯块体内的病毒后，获得的经检测无病毒或极少有病毒侵染的种薯。

在马铃薯栽培过程中，植株的逐年变小，叶片皱缩卷曲，叶色浓淡不均，茎秆矮小细弱，块茎变形龟裂，产量逐年下降等现象，这种现象叫“退化”。种薯“退化”是引起产量降低和商品性状变差的主要原因。“退化”主要原因是病毒的侵染及其在薯块内积累。危害马铃薯的病毒有17种之多，如X病毒、S病毒、Y病毒、M病毒、A病毒、花叶病毒、纺锤形块茎病毒等。马铃薯病毒可使块茎产量减少50%~80%。

茎尖脱毒与培养1、取材。茎尖是用于马铃薯脱毒快繁的常用材料。在促使块茎萌发生长的过程中可结合进行热疗处理，对古巴花叶病毒、X病毒和S病毒尤为有效。方法是在暗处萌芽，待芽长到1?2cm时，用35°C的温度处理7?28天。

2、茎尖消毒。取1厘米的茎尖，水洗干净，无菌条件下先用70％的酒精浸组织15-20秒，再用2％次氯酸钠溶液浸泡4--5min，然后用无菌水冲洗3次。

3、接种。把消毒芽在解剖镜下逐层剥去幼叶，露出圆滑的生长点，留1-2个叶原基，0.2—0.3毫米，随即接种于MS液体培养基上，每升加0.1-1.0mg/LNAA、0.5-1.0mg/LGA3、0.5mg/LBA，2%蔗糖，pH值5.8。茎尖大小同脱毒效果关系极为密切，茎尖外植体越小，脱毒效果越好，但操作和培养的难度越大，故两者必须综合考虑。总的原则是应尽量切取较小的茎尖，以提高脱毒效果。

4、培养。培养温度：21~25℃光照度：2000-3000lx光照时间：12h/d。2-3周长出愈伤，4-5周长绿点，经过3--6月长成2-3厘米小芽，越慢越好，出芽很快的扔掉。

5、病毒鉴定。指示植物鉴定法：Ｘ病毒、Ｓ病毒和纺锤块状病毒很容易通过汁液来接种。马铃薯常用的鉴定寄主植物有苋科的千日红，茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。寄主植物应在无虫网室中培养。叶片洗净后。在消毒的研钵中研成糊状，用纱布滤出汁液，再用蒸馏水稀释１０倍作为接种物(混入６００目的金刚砂)。用左手心紧靠在鉴定寄主植物的背面，以右手指蘸取接种液，均匀的在叶背面擦过，以不造成叶片产生伤痕为度，最后把叶面上多余的接种物用清水洗净，放置在１５～２４的防虫室中，一般５－１０天可发病。

6、继代和生根。培养成功的马铃薯脱毒苗，经ELISA（试剂盒）鉴定后（试管苗应每3月检测一次，每年4次）采用固体、液体培养基相结合方法扩繁。

取试管苗单节切段扦插在（或平放）固体培养基上，每瓶可插20个左右茎段，经20d左右发育成5~10cm高小植株，继续进行切段繁殖，此法速度快，每月可繁殖5~8倍，试管苗多节接种在液体培养基上，进行浅层静止液体培养。继代培养时温度20-25℃，光照3000-4000LX，光照时间14-16小时；每3周继代一次，单芽茎段约1厘米；原则试管苗用2年—3年。

7、驯化。炼苗室温度：白天23~27℃，夜间不低于14℃。炼苗具体方法：移植前7d左右，将长有3~5片叶、高2~3cm的试管苗，在不开瓶口的状态下，从培养室移至温室排好。为防止强光、高温灼伤试管苗，在温室顶上加盖一层黑色遮阳网。

8、无毒材料的保存。将无毒原种种在温室或防虫罩内灭过菌的土壌里，以防止蚜虫传毒及各种条件下的机械传毒。在大规模繁殖这些植株时，应该把它们种植在田间隔离区内，或采用春播早留种和夏留种的方法，也可以把经茎尖脱毒处理的无病毒植株，再通过离体培养进行繁殖与保存。

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