葡萄VvGCN5基因的鉴定及互作蛋白筛选_陈雪琴.pdfVIP

－

南京农业大学学报２０２３，４６（５）：８５２８６１ｈｔｔｐ：／／ｎａｕｘｂ．ｎｊａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ

ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｎｊｉｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＤＯＩ：１０．７６８５／ｊｎａｕ．２０２２０８００４

－

陈雪琴，庞倩倩，裴丹，等．葡萄ＶｖＧＣＮ５基因的鉴定及互作蛋白筛选［Ｊ］．南京农业大学学报，２０２３，４６（５）：８５２８６１．

ＣＨＥＮＸｕｅｑｉｎ，ＰＡＮＧＱｉａｎｑｉａｎ，ＰＥＩＤａｎ，ｅｔａｌ．ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｇｒａｐｅＶｖＧＣＮ５ｇｅｎｅａｎｄｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｎｊｉｎｇ

－

ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０２３，４６（５）：８５２８６１．

葡萄ＶｖＧＣＮ５基因的鉴定及互作蛋白筛选

陈雪琴，庞倩倩，裴丹，任艳华，房经贵∗

（南京农业大学园艺学院，江苏南京２１００９５）

摘要：［目的］本文旨在揭示组蛋白乙酰转移酶ＧＣＮ５（ｇｅｎｅｒａｌｃｏｎｔｒｏｌｎｏｎ⁃ｒｅｐｒｅｓｓｉｂｌｅ５）在葡萄生长发育过程中的调控机制，

并筛选出与ＶｖＧＣＮ５互作的蛋白，以期为进一步构建ＶｖＧＣＮ５在葡萄生长发育中的调控网络提供理论基础。［方法］利用

生物信息学技术对ＶｖＧＣＮ５的蛋白二级结构、基因结构、功能域、启动子的顺式作用元件以及抗逆的表达量和时空表达进

行分析，并在烟草中进行亚细胞定位，研究ＶｖＧＣＮ５表达位置。通过酵母双杂交技术筛选与ＶｖＧＣＮ５互作的蛋白，并通过

－－

双分子荧光互补（ＢＩＦＣ）技术进行验证。［结果］ＶｖＧＣＮ５的二级结构由α螺旋、延伸链、β折叠以及无规则卷曲构成，含有

１０段内含子序列和１１段ＣＤＳ序列，具有Ａｃｅｔｙｌｔｒａｎｓｆ＿１和Ｂｒｏｍｏｄｏｍａｉｎ结构域，以及ＡＲＥ、ＧＴ１⁃ｍｏｔｉｆ、ＴＧＡＣＧ⁃ｍｏｔｉｆ、ＣＡＴ⁃

ｂｏｘ、ＣＧＴＣＡ⁃ｍｏｔｉｆ等顺式作用元件。通过查询ＧＥＯ数据库发现ＶｖＧＣＮ５可能受到光照和灰霉病的影响。ＶｖＧＣＮ５主要表

达于葡萄的成熟茎、萌芽初期、心皮、种子中。亚细胞定位发现ＶｖＧＣＮ５位于细胞核和细胞膜上。此外，以ｐＧＢＫＴ７⁃ＶｖＧＣＮ５

作为诱饵蛋白，通过酵母双杂交技术和双分子荧光互补技术发现８个阳性蛋白与ＶｖＧＣＮ５互作。［结论］本研究鉴定并分

析了ＶｖＧＣＮ５的基本信息，并得到了８个与ＶｖＧＣＮ５互作的蛋白。

关键词：葡萄；ＶｖＧＣＮ５；酵母双杂交技术；双分子荧光互补；生物信息学分析

－－－

中图分类号：Ｑ９４３．２；Ｓ５１２．１文献标志码：Ａ文章编号：１０００２０３０（２０２３）０５０８５２１０

ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｇｒａｐｅＶｖＧＣＮ５ｇｅｎｅａｎｄ

ｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｉｎｔｅ