抗血清的制备(实验).ppt

溶血反应操作程序(倍比稀释法)管号12345678对照生理盐水200200200200200200200200血清200200200200200200200RBC200200200200200200200200终稀释度1/41/81/161/321/641/1281/256--弃去单位：uL第31页,共33页，2024年2月25日，星期天观察结果时，应先观察对照管结果是否正确。对照管应不溶血，在对照管结果全部正确前提下观察待测血清管的结果，以出现完全溶血作为抗体的效价。第32页,共33页，2024年2月25日，星期天感谢大家观看第33页,共33页，2024年2月25日，星期天关于抗血清的制备(实验)选择合适的抗原分离纯化抗原选择免疫动物确定免疫方案和程序免疫动物采血分离血清抗血清的纯化与鉴定抗血清制备的基本流程第2页,共33页，2024年2月25日，星期天设计实验方案的设计1.设计本实验的理由（实验目的）。2.实验方案设计。3.可行性（理论、人员、实验条件等）。4.创新性。5.本实验要解决的主要问题。6.预期目标。每个组交一份实验方案（3-4个同学一组）第3页,共33页，2024年2月25日，星期天论文式实验报告一、题目的选择1、准确、具体、简洁、醒目，使人一目了然，引起重视2、作者与单位(班级)，并注明所在班级和指导教师姓名。3、摘要和关键词摘要是对论文主要内容和观点的概括第4页,共33页，2024年2月25日，星期天论文式实验报告二、关键词又称主题词或索引词，一篇论著(论文)一般选用2～5个关键词第5页,共33页，2024年2月25日，星期天论文式实验报告三、引言(前言)引言是论文正文的开场白1、引起读者对本论文的兴趣。2、为读者提供理解本论文所需的背景资料。第6页,共33页，2024年2月25日，星期天论文式实验报告四、材料与方法材料1、实验对象2、实验材料3、实验分组4、实验过程和方法6、数据处理等内容。第7页,共33页，2024年2月25日，星期天论文式实验报告五、结果：结果是实验研究成果的结晶第8页,共33页，2024年2月25日，星期天论文式实验报告六、讨论1.11.21.3对实验结果解释和评价第9页,共33页，2024年2月25日，星期天论文式实验报告七、参考文献期刊：著者．文章名．刊物名称，卷或年(期)：文章的起讫页码书籍：编著者．书名．版本．出版地：出版者，年份第10页,共33页，2024年2月25日，星期天一、颗粒性抗原的制备（2%~5%RBC的制备）（1）静脉采血2-3ml，注入抗凝管中，轻轻混匀。（2）洗涤RBC将上述抗凝血移至10ml试管中，加入NS6-7ml，混匀，2500r/min离心5min,去上清。重复上述操作三次，最后一次去上清后，将红细胞配制成2%~5%的RBC悬液。第11页,共33页，2024年2月25日，星期天2、取上述RBC悬液1ml免疫家兔。免疫部位：静脉、皮内、皮下等。每只兔子免疫8~10点，每点0.1ml左右。每隔2~4天免疫一次。第12页,共33页，2024年2月25日，星期天1班免疫时间表每隔2天免疫一次第13页,共33页，2024年2月25日，星期天2班免疫时间表每隔3天免疫一次第14页,共33页，2024年2月25日，星期天3班免疫时间表每隔4天免疫一次第15页,共33页，2024年2月25日，星期天3、心脏采血10ml，凝固后，分离血清（2000转/min,5分钟)。4、取两支小试管并以A、B标记之，将上述血清一半加入A管，另一半加入B管。将A管置于56℃水浴箱30分钟（灭活补体）。第16页,共33页，2024年2月25日，星期天5、抗血清效价的鉴定。凝集试验和溶血反应第17页,共33页，2024年2月25日，星期天凝集反应第18页,共33页，2024年2月25日，星期天实验原理指颗粒性抗原(RBC)与相应抗体特异结合，在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象。第19页,共33页，2024年2月25日，星期天试管凝集试验过程1.取洁净小试管8支，排列于试管架上，依次编号。2.向各管中加入生理盐水200ul。第20页,共33页，2024年2月25日，星期天3.向第一支试管中加入A管血清200ul，充分混匀，吸出200ul放入第二管，混匀后取出200ul加入第三管中，如此类推直至第七管，混匀后取出200ul弃去。第