植物组培的培养基.ppt

（四）、常见生长调节剂的微摩尔/升浓度与毫克/升的换微摩尔/升毫克/升IAAIBANAA2,4-DKTBA2iPZTTDZGA310.1750.20320.18620.22100.21520.22530.20270.21900.22020.346420.35040.40640.37240.44210.43040.45050.40540.43800.44040.692730.52550.60940.55860.66310.64560.67580.60810.65700.66061.039140.70070.81280.74480.88420.86080.90100.81080.87600.88081.385550.87591.01600.93101.10521.07611.12631.01351.09501.10101.731961.05111.21921.11721.32621.29131.35161.21621.31401.32122.078271.22631.42241.30341.54731.50651.57681.41891.53301.54142.424681.40141.62561.48961.76831.72171.80211.62161.75201.76162.771091.57661.82881.67581.98941.93692.02731.82431.97101.98183.1173第32页,共60页，2024年2月25日，星期天四、培养体支持材料1.琼脂用量7－10g/L（0.7%-1%）注意：1若浓度过高，培养基就会变得很硬，营养物质就难于扩散到培养的组织中。2当进行营养需要研究时，应注意不要使用琼脂，因为市场供应所有琼脂含有杂质，特别是含有Ca,Mg和微量元素。2.其它卡拉胶、玻璃纤维、滤纸桥、海绵等▲第33页,共60页，2024年2月25日，星期天五、辅助性物质1.抗生素2.抗氧化物3.活性炭▲第34页,共60页，2024年2月25日，星期天抗生素1.常用种类：青霉素链霉素庆大霉素等2.用量：5%－20%3.作用：防止由外植体内生菌造成的污染。4过滤灭菌▲第35页,共60页，2024年2月25日，星期天抗氧化物常用抗氧化剂及使用：半胱氨酸VC（50－200mg/L液洗涤外植体伤口表面）。活性炭1.作用：具吸附作用；茎尖初代培养可防褐化；促进新梢增殖（浓度0.1－0.2%）；促进生根；防止组培苗玻璃化（浓度0.3%）。利于胚胎培养。2.常用浓度：0.5－10g/L3.活性炭的作用①对生长的抑制：其吸附了植物激素②对生长的刺激：其吸附了有抑制作用的物质▲第36页,共60页，2024年2月25日，星期天第二节培养基配制一、母液配制与保存二、培养基配制第37页,共60页，2024年2月25日，星期天(一)母液配制流程图称量母液分装确定培养基溶解定容贴标签保存于冰箱一、母液配制(以MS为例)第38页,共60页，2024年2月25日，星期天称量药品天平预置全显示清零称药第39页,共60页，2024年2月25日，星期天(二)母液配制要求：1.母液浓缩倍数：10-100，大量元素10；微量元素、铁盐100；有机物50；2.选用蒸馏水、重蒸馏水、分析纯或化学纯试剂3.防止沉淀4.激素母液浓度：1mg/ml,1次配成50或100ml5.激素溶解：IAA、IBA、GA、ZT先溶95%酒精再定容；NAA先溶于热水或95%酒精再加水；2，4-D先溶于1MNaOH再加水；KT、BA先溶于1MHCl再加水。第40页,共60页，2024年2月25日，星期天为什么要配制母液？1）方便2）准确（有些成分量太小）3）母液要分类配，否则有些成分混合一起会产生沉淀以MS培养基为例：第41页,共60页，2024年2月25日，星期天M