氨基酸与蛋白质的一级结构.ppt

(六)肽段的次序—重叠肽法采用两种或多种不同的断裂方法将多肽样品断裂成两套或多套肽段或肽碎片，并将其分离开来。利用两套或多套肽段的氨基酸顺序彼此间的交错重叠，拼凑出整条多肽链的氨基酸顺序。第63页,共69页，2024年2月25日，星期天示例(十肽的水解)A法水解得到四个小肽：A1Ala-PheA2Gly-Lys-Asn-TyrA3Arg-TyrA4His-ValB法水解得到三个小肽：B1Ala-Phe-Gly-LysB2Asn-Tyr-ArgB3Tyr-His-Val第64页,共69页，2024年2月25日，星期天二、测定基因序列得蛋白一级结构●如何定出一级结构：蛋白质的氨基酸顺序(1)直接测定氨基酸测序： Edmandegradation F.Sanger(CambridgeU.) →Insulin胰島素(A,Bchains)(2)由cDNA序列反推氨基酸序列： 第65页,共69页，2024年2月25日，星期天五、血红蛋白分子病（47）分子病指蛋白质分子中由于AA排列顺序与正常蛋白质不同而发生的一种遗传病(基因突变造成的)。镰刀状细胞贫血病：病人体内血红细胞的量及红蛋白的含量都较正常人少，且红细胞的形状为新月形，即镰刀状。病因：血红蛋白AA顺序的细微变化正常人HbA—?N6Glu病人HbS—?N6Val第66页,共69页，2024年2月25日，星期天第67页,共69页，2024年2月25日，星期天镰刀型血红蛋白分子第68页,共69页，2024年2月25日，星期天感谢大家观看第69页,共69页，2024年2月25日，星期天****說明文字**說明文字**說明文字****ala-phe-gly-lys-asn-tyr-arg-**除了直接定序外，若知道某蛋白質的cDNA序列，則依遺傳密碼可以翻成胺基酸序列，也是可以得到其一級序列。由於分子生物學的快速發展，使得要定出某蛋白質的cDNA序列非常方便，現今多以此方法定整條蛋白質的序列。第三节肽和蛋白质一个氨基酸的羧基与另一个氨基酸的氨基之间失水形成的酰胺键称为肽键，所形成的化合物称为肽。一、肽、肽键与肽链由两个氨基酸组成的肽称为二肽，由几个到几十个氨基酸组成的肽称为寡肽，由更多个氨基酸组成的肽则称为多肽。组成肽链的氨基酸单元称为氨基酸残基。第31页,共69页，2024年2月25日，星期天在多肽链中，氨基酸残基按一定的顺序排列，这种排列顺序称为氨基酸顺序。方向性：一条多肽链有两个末端，自由?-氨基，称为氨基端或N-端；游离?-羧基，称为羧基端或C-端。氨基酸的顺序：N-端→C-端如上述五肽可表示为：Ser-Val-Tyr-Asp-Glu丝氨酰缬氨酰酪氨酰天冬氨酰谷氨酸肽单位主链：侧链第32页,共69页，2024年2月25日，星期天二、肽的解离性质肽具有酸碱两性性质和等电点。肽的酸碱性质主要来自游离末端?-NH2和游离末端?-COOH以及侧链R上可解离的基团。每一种肽都有其相应的等电点。末端?-NH2,?-COOH比游离氨基酸的酸碱度降低。第33页,共69页，2024年2月25日，星期天第34页,共69页，2024年2月25日，星期天三、生物活性肽在生物体中，多肽最重要的存在形式是作为蛋白质的亚单位。但是，也有许多分子量比较小的多肽以游离状态存在。这类多肽通常都具有特殊的生理功能，常称为活性肽。如：脑啡肽；激素类多肽；抗生素类多肽；谷胱甘肽；蛇毒多肽等。部分肽中含有D-氨基酸。第35页,共69页，2024年2月25日，星期天CO-NH-CH-CO-NH-CH2-COOHCH2CH2CHNH2COOHCH2SH???1.参与体内氧化还原反应2.作为辅酶参与氧化还原反应保护巯基酶或含Cys的蛋白质中SH的还原性防止氧化物积累GSH+GSH----GSSG第36页,共69页，2024年2月25日，星期天第四节、蛋白的分离根据：所要提取的蛋白（目的蛋白）与其它蛋白（杂蛋白）的不同进行分离。■