生物分离工程细胞破碎.pptxVIP

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$number{01}生物分离工程细胞破碎2024-01-25汇报人:AA

目录细胞破碎概述机械法细胞破碎非机械法细胞破碎细胞破碎效果评价细胞破碎在生物分离工程中的应用细胞破碎技术发展趋势与挑战

01细胞破碎概述

细胞破碎是指利用物理、化学或生物方法,将细胞壁或细胞膜破坏,使细胞内的物质释放出来,以便进一步分离和纯化。细胞破碎是生物分离工程中的重要步骤,其目的在于获取细胞内的目标产物,如蛋白质、酶、核酸、多糖等,以满足后续分离纯化的需求。定义与目的目的定义

细胞破碎是生物分离工程的基础步骤之一,为后续分离纯化过程提供原料。细胞破碎的效果直接影响目标产物的收率和纯度,因此选择合适的破碎方法至关重要。随着生物技术的不断发展,细胞破碎技术也在不断改进和完善,以适应不同种类细胞和目标产物的需求。细胞破碎在生物分离工程中的地位

化学法物理法机械法细胞破碎方法分类包括研磨、搅拌、高压均质等方法,通过机械力作用使细胞破裂。包括酸碱处理、有机溶剂处理等方法,通过化学反应使细胞壁或细胞膜破坏。包括超声波、微波、激光等方法,通过物理效应使细胞破裂。

02机械法细胞破碎

123高速搅拌法缺点破碎效果受细胞类型、搅拌速度和时间等因素影响,可能产生大量泡沫,不利于后续分离纯化。原理利用高速旋转的搅拌器叶片对细胞产生强烈的剪切力,使细胞破裂。优点操作简单,适用于大规模生产。

缺点原理优点珠磨法可能会产生一些珠子的碎片,需要后续处理。将细胞与一定大小的玻璃珠或陶瓷珠一起放入珠磨机中,通过高速旋转产生的摩擦力使细胞破裂。破碎效率高,适用于各种细胞类型。

将细胞悬浮液在高压下通过狭窄的缝隙,使细胞受到强烈的剪切力和撞击力而破裂。原理优点缺点破碎效果好,适用于各种细胞类型,可大规模生产。需要高压设备,能耗较高。030201高压均质法

利用超声波的空化作用产生的冲击波和微射流对细胞进行破碎。原理破碎效率高,适用于各种细胞类型,操作简便。优点可能会产生大量泡沫,不利于后续分离纯化,且长时间使用可能对设备造成损坏。缺点超声波破碎法

03非机械法细胞破碎

将细胞置于高渗溶液中,使细胞内部水分渗出,细胞体积缩小,细胞壁破裂。高渗溶液处理将细胞置于低渗溶液中,水分进入细胞,使细胞膨胀破裂。低渗溶液处理渗透压冲击法

针对细胞壁的成分选择合适的酶,如纤维素酶、果胶酶等。酶的选择控制酶解的温度、pH值和时间等条件,使酶能够充分发挥作用。酶解条件酶解法

有机溶剂处理利用有机溶剂如甲醇、乙醇等处理细胞,使细胞壁溶解破裂。表面活性剂处理使用表面活性剂如SDS、Tween等破坏细胞膜结构,使细胞内容物释放。化学法

冷冻处理将细胞冷冻至冰点以下,形成冰晶破坏细胞膜。融化处理将冷冻的细胞迅速融化,使细胞内容物释放。冻融法

04细胞破碎效果评价

破碎率与得率破碎率表示细胞破碎的程度,即被破碎细胞占总细胞数的百分比。破碎率越高,说明细胞破碎越完全。得率指从破碎细胞中释放出的目标产物占细胞总产物的百分比。得率越高,说明细胞破碎效果越好,目标产物的回收率也越高。

通过粒度分析仪测定破碎后细胞碎片的粒径分布,以评估破碎效果的均匀性。粒度分布越集中,说明破碎效果越均匀。粒度分布利用显微镜观察破碎前后细胞的形态变化,以直观地评估细胞破碎效果。观察时应注意细胞壁的破裂程度、细胞内容物的释放情况等。形态学观察粒度分布与形态学观察

生物活性测定酶活性测定对于含有酶类物质的细胞,可通过测定破碎后酶活性的变化来评估细胞破碎效果。酶活性越高,说明细胞破碎效果越好。蛋白质测定通过测定破碎后细胞中蛋白质的含量变化,以评估细胞破碎对蛋白质释放的影响。蛋白质含量越高,说明细胞破碎效果越好。其他生物活性物质测定根据目标产物的特性,可选择相应的生物活性测定方法,如抗氧化活性测定、免疫活性测定等,以全面评估细胞破碎效果。

05细胞破碎在生物分离工程中的应用

03改善下游处理工艺细胞破碎后,发酵液中的固体颗粒减少,有利于后续的过滤、浓缩等处理工艺。01破碎细胞壁,释放胞内物质通过物理或化学方法破碎微生物细胞壁,使胞内物质如蛋白质、酶、多糖等释放出来,便于后续的分离和纯化。02提高产物收率细胞破碎有助于充分暴露胞内产物,减少产物的损失,从而提高产物的收率。微生物发酵液处理

123通过细胞破碎技术破碎动植物组织细胞,使细胞内的有效成分如蛋白质、多糖、核酸等释放出来,便于后续的提取和分离。破碎组织细胞,提取有效成分细胞破碎有助于增加有效成分的暴露面积,提高提取效率。提高提取效率细胞破碎后,可以通过过滤等方法去除破碎的细胞碎片和其他杂质,提高提取液的纯度。减少杂质含量动植物组织提取液处理

破碎酶解细胞,释放酶解产物通过细胞破碎技术破碎酶解细胞,使酶解产物如多肽、氨基酸等释放出来,便于后续的分离和纯化。提高酶解效率细胞破碎有助于增加底

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