ZNF205通过靶向RIG-Ⅰ正调控RLR信号通路.pdf

摘要

模式识别受体（PatternRecognitionReceptor，PRRs）能够直接识别病原体，

其通过与配体的识别与结合，发挥天然免疫抗感染、抗肿瘤等免疫保护作用。不

同的PRRs识别不同的配体，RIG-I样受体（RIG-Ilikereceptors）是一种重要的

胞质RNA识别受体。其中RIG-I识别病毒RNA后，与接头蛋白VISA相互作用，

随后激活下游信号转导，诱导Ⅰ型干扰素及促炎细胞因子产生。

RIG-I作为信号启动的关键，其活性被严格调控，以避免过度和不协调的细

胞因子产生。为了进一步探索RIG-I的调节机制，我们使用酵母双杂交技术筛选

并鉴定ZNF205为RIG-I的新型相互作用蛋白。通过双荧光素酶报告基因实验，

我们发现过表达ZNF205能够促进SeV诱导的干扰素启动子(IFN-β-promoter)及干

扰素刺激元件(ISRE)的活化。并且在mRNA水平上，过表达ZNF205能够有效增

强下游抗病毒基因IFNBI及CXCL10的转录。此外，过表达ZNF205会抑制

VSV-GFP病毒的复制。之后，我们使用CRISPRCas9技术将ZNF205敲除，通

过qPCR，非变性凝胶电泳，病毒空斑等实验，进一步验证了敲除ZNF205会抑

制Ⅰ型干扰素的产生及细胞抗病毒的能力。

通过进一步实验发现，ZNF205的锌指结构域与RIG-ICARD结构域相互作

用，并且能增强SeV诱导的IFN-β-promoter及ISRE的激活。机制实验表明，

ZNF205增强RIG-ICARD结构域K63连接的多聚泛素化，并主要靶向K164及

K172残基促进RIG-I的泛素化。综上所述，本研究揭示了ZNF205通过促进RIG-I

上K164及K172位点的泛素化修饰从而正调控RLR抗病毒天然免疫响应。

目前，关于ZNF205在先天免疫中的功能的研究并不是很多。在本研究中，

我们首次发现了ZNF205在RIG-I介导的抗病毒信号通路中的正调控作用。然而

关于ZNF205调控RIG-I的精细机制尚需要更深入的探索。

关键词：ZNF205；RIG-I；泛素化；RLR抗病毒信号通路

I

Abstract

PatternRecognitionReceptors(PRRs)areabletodirectlyrecognizepathogens

and,byrecognizingandbindingtoligands,providenaturalimmuneprotectionagainst

infections,tumorsandotherdiseases.DifferentPRRsrecognizedifferentligands,and

RIG-Ilikereceptors(RIG-Ilikereceptors)areanimportantcytoplasmicRNA

recognitionreceptor.Amongthem,RIG-IrecognizesviralRNAandinteractswiththe

adapterproteinVISA,whichsubsequentlyactivatesdownstreamsignalingand

inducestypeIinterferonandpro-inflammatorycytokineproduction.

TheactivityofRIG-I,akeytosignalinitiation,istightlyregulatedtoavoid

excessiveanduncoordinatedcytokineproduction.Tofurtherexploret