阿魏酸联合葡萄糖降低β-乳球蛋白致敏性的机制初探.pdf

摘要

β-乳球蛋白（β-lactoglobulin，BLG）是一种具有高营养价值和多种功能特

性的牛乳清蛋白，但其也是牛乳中的一种主要过敏原，严重阻碍了BLG在食

品工业领域的应用。因此，如何消减BLG的致敏性是目前食品安全领域研究

的难点和热点。基于此，本文以BLG为研究对象，选用阿魏酸和葡萄糖先后

对其进行共价修饰，制备阿魏酸联合葡萄糖共价修饰的BLG，通过十二烷基

磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳、圆二色谱、红外光谱、内源荧光和紫外吸收光-

谱等方法对其结构进行表征；采用ELISA和细胞等实验对其致敏性进行评估，

进一步构建BALB/c小鼠模型探究阿魏酸联合葡萄糖修饰的BLG对小鼠过敏

反应、肠道菌群以及血清代谢物的影响，探究阿魏酸联合葡萄糖降低BLG致

敏性的分子机制，得出以下结论：

（1）阿魏酸联合葡萄糖共价修饰BLG后，SDS蛋白条带向上迁移，

而游离氨基、色氨酸、巯基含量显著降低，其二级结构和构象结构发生改变；

与单一的阿魏酸、葡萄糖修饰比较，阿魏酸联合葡萄糖修饰降低了BLG的

IgE结合能力、KU812细胞中His和IL-6的分泌水平以及RBL-2H3细胞的脱

颗粒、IL-4和TNF-α释放水平。因此，阿魏酸联合葡萄糖会改变BLG的表位

结构，显著降低其致敏性；

2BLGBALB/c

（）阿魏酸联合葡萄糖修饰的对敏化后的小鼠进行激发后，

小鼠的过敏症状评分、直肠温度波动性、肝脏、胸腺指数均有所降低，血清中

的特异性IgE、IgG、IgG1、组胺及mMCP-1含量也显著降低，同时缓解小鼠

十二指肠、脾脏的免疫损伤程度以及调节脾脏、肠系膜淋巴细胞的体外抗原再

刺激能力。结果表明阿魏酸联合葡萄糖修饰的BLG能降低小鼠的过敏风险；

3BLGBALB/c

（）能诱导小鼠发生过敏反应，同时破坏小鼠肠道菌群的

多样性和结构组成，减少肠道菌群代谢产物短链脂肪酸（乙酸、丙酸、丁酸）

的含量，而阿魏酸联合葡萄糖修饰的BLG增加了Lactobacillaceae、

Rikenellaceae、Lachnospiraceae、Marinifilaceae、Bacteroidaceae等科水平菌群

StaphylococcaceaeCorynebacteriaceae

的相对丰度，降低了、的相对丰度，在属

LactobacillusAlistipesOdoribacterBacteroides

水平上增加了、、、菌属的相对

丰度；与Control组相比，BLG组血清非靶代谢中富集了ProstaglandinD2、

12(S)-HpETE、PGJ2、12(R)-HETE、ProstaglandinF2a、15-deoxy-delta-12,14-

PGJ2HepoxilinB37

、种花生四烯酸代谢途径的代谢物，在色氨酸代谢途径中

N-Acetylserotonin4-(2-Aminophenyl)-24-dioxobutanoicacid

富集了、和代谢物，

I

而阿魏酸联合葡萄糖修饰的BLG对花生四烯酸代谢途径只富集了

ProstaglandinF2a，色氨酸代谢通路则富集了3-Hydroxyanthranilicacid、

Indoleaceticacid、KynurenicAcid、4-(2-Amino-3-hydroxyphenyl)-2,4-

dioxobutanoicacid、L-Tryptophan、XanthurenicAcid8种代谢物，表明阿魏酸

联合葡萄糖修饰的BL