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T4 DNA连接酶的改造及其在NGS建库中的应用研究 .docx

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    T4DNA连接酶的改造及其在NGS建库中的应用研究

    摘要

    众所周知，T4DNA连接酶对平末端DNA连接效率很低，在没有PEG的体系中对粘性末端DNA连接效率也不高。本文在T4DNA连接酶的基础上，通过In-fusion克隆技术构建了含有T4DNA连接酶基因和Sso7dDNA结合蛋白基因的重组质粒。然后通过在Ecoli中的诱导表达，得到了可溶表达的重组型T4DNA连接酶融合蛋白，利用亲和柱及离子柱纯化，得到高纯度的重组型T4DNA连接酶融合蛋白。最后经重组型T4DNA连接酶融合蛋白连接效率

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