谷氧还蛋白S在大肠杆菌E.coli 中的表达纯化及特异性研究.docx

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摘 要   谷氧还原蛋白S是一类通过调节氧化还原反应维持蛋白质稳态的小分子蛋白,对生物的抗氧化反应和生长发育等方面发挥重要作用。为了解清楚S蛋白的抗氧化机制,需要建立简便快速且能大量获得S蛋白的有效方法。本实验在原核系统大肠杆菌中通过基因克隆,从基因文库中获得cDNA,并构建了含目的基因的原核表达载体,使用异丙基硫代半乳糖苷( IPTG)在大肠杆菌中诱导可溶性表达,并进一步利用亲和层析进行纯化,成功得到纯度较高的谷氧还蛋白S,建立了S蛋白的体外重组表达体系。同时,对获得的谷氧还蛋白S进行质谱分析,研究其特异性。本实验通过质粒重组、原核表达和蛋白纯化技术,建立一种快速便捷且能获得大量S蛋白的有

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