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液质联用仪是一种利用液相色谱技术和质谱联合技术,实现高效分离和快速测定的新型设备。它的特点是高效、灵敏、精确,并且可以根据分子量或结构信息提供分子量和结构信息。液质联用仪的主要组成部分包括色谱柱、离子源、质量分析器、真空系统、计算机数据处理系统。液质联用仪可以用于各种类型的有机污染物的分析和研究,如农药残留、重金属污染等。液质联用仪的广泛应用不仅可以提高分析的准确性和效率,还可以节省实验成本,提高资源利用率。
液质联用仪原理及操作注意事项LDD本文档共24页;当前第1页;编辑于星期一\16点51分
高效液相色谱质谱联用(HPLC/MS)是指高效液相色谱与质谱串联的技术,是将应用范围极广的高效液相分离方法与灵敏、专属、能够提供分子量和结构信息的质谱法结合起来的一种现代分析技术。液质联用技术简介本文档共24页;当前第2页;编辑于星期一\16点51分
HPLC-MS主要由HPLC仪、接口离子源(LC与MS连接装置)、质量分析器、真空系统、计算机数据处理系统组成。过程:混合样品通过液相色谱系统进样,由色谱柱分离,从色谱仪流出的被分离组分依次通过接口进入MS仪的离子源处被离子化,然后离子被聚焦于质量分析器中,根据质荷比而分离,分离后的离子信号转变为电信号,传送至数据处理系统,对样品进行定性定量分析。液质联用技术简介本文档共24页;当前第3页;编辑于星期一\16点51分
质谱系统的结构介绍(ESI、库伦爆炸)定量方法的开发液质联用各系统的操作注意事项质谱系统的维护 主要内容本文档共24页;当前第4页;编辑于星期一\16点51分
一、质谱的系统结构示意图本文档共24页;当前第5页;编辑于星期一\16点51分
质谱系统各部件介绍1.离子源 :产生离子化,并将产生的离子在电场的作用下进入毛细管 3.离子光学组件:包括skimmer 1,八级杆以及Len 1和Len 2,进一步除去溶剂和中性分子,高效的离子传输组件,聚焦随机运动的离子进入四级杆。2.毛细管 :离子导入通道,将离子源产生的离子传输进入质谱,同时隔离外部的常压与质谱内部的高真空4.四级杆MS1和MS2:质量过滤器,优化离子传输和质谱分辨率,可以选择让某些质荷比的离子一次通过或者所有离子全通过。5.碰撞池:高压碰撞池,优化裂解,六级杆设计有助于捕获碎片离子6.检测器:包括高能打拿级和电子倍增器,增强信号,高增益毛细管电压 Capillary Voltage毛细管出口电压Fragmentor碰撞能 Collision energy电子倍增电压 EMV本文档共24页;当前第6页;编辑于星期一\16点51分
ESI离子源的原理 ESI将溶液中的离子转变为气相离子三大步骤:1.在喷雾毛细管尖端产生带电雾滴2.通过溶剂蒸发和雾滴分裂使带电雾滴变小,这一过程反复进行,直至生成很小的带电雾滴3.由很小带电雾滴产生气相离子特点1.直角喷雾离子源设计,大大减少了未离子化的中性液滴进入质谱中,降低噪音,保证毛细管和离子光路更干净,抗污染2.反吹干燥系统,加速喷雾的溶剂挥发,减少溶剂簇和流动相的附加离子,在standby状态时,仍维持一定的干燥气温度和流量,避免空气吸入质谱真空系统,极大的减少了污染本文档共24页;当前第7页;编辑于星期一\16点51分
库伦爆炸原理:带有被测物质离子的流动相在雾化针尖端发生雾化,液滴表面富集带同种电荷的离子,内部带相反电荷聚集,形成带电液滴细的喷雾,在电场的作用下,飞向毛细管。加热的氮气干燥气体反向流动,带走液滴中的中性溶剂分子,从而收缩液滴,直至排斥的静电力超过液滴表面张力,引起库伦爆炸,过程不断重复,待分析物离子最终变成气态进入毛细管。本文档共24页;当前第8页;编辑于星期一\16点51分
1.全扫描scan,确认得到化合物离子质量数2.选择离子模式,优化毛细管出口电压(fragmentor),保证母离子的传输效率3.子离子扫描,使用优化好的fragmentor,选择定量离子,优化碰撞能量,优化子离子的响应4多重反应监测MRM定量,使用已优化好的fragmentor,优化每个子离子的碰撞能MS2 ScanMS2 SIMProduct Ion ScanMRM二、定量方法的开发逻辑顺序:本文档共24页;当前第9页;编辑于星期一\16点51分
1.MS2 Scan 确定待测物的分子离子本文档共24页;当前第10页;编辑于星期一\16点51分
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过膜处理流动相以及样品必须过膜(有机滤膜、水系膜)流动相应超声脱气10~20min,否则压力易波动(装有在线脱气机,影响会小一些)流动相每两天至少更换缓冲盐的使用反相常用流动相为甲醇、乙腈、水以及缓冲盐溶液。注意:LC中常采用无机缓冲盐,LC/MS中则应该使用挥发性的缓冲盐,
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