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归一化法（NORM） 当前第30页\共有49页\编于星期一\14点 外标法（ESTD） 当前第31页\共有49页\编于星期一\14点 内标法（ISTD） 当前第32页\共有49页\编于星期一\14点 选择内标物的标准 1. 样品中不存在 2. 容易得到 3. 化学性质与样品相似 4. 不会与样品发生反应 5. 在感兴趣组分附近流出 6. 与其它组分分离度良好 7. 色谱性质稳定 * 内标与样品的浓度范围应接近 当前第33页\共有49页\编于星期一\14点 第三章 液相色谱分析 高效液相色谱与气相色谱比较 高效液相色谱仪构造（原理，维护） 常见问题及维护 当前第34页\共有49页\编于星期一\14点 相同：兼具分离和分析功能，均可以在线检测 差别：分析对象和流动相的差别 （1）分析对象差别 气相色谱： 能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品； 占有机物的20% 高效液相色谱： 不受样品挥发性和热稳定性的限制， 分子量大、难气化、热稳定性差及离子型样品均可检测； 占有机物的80% 3.1 高效液相色谱与气相色谱比较 当前第35页\共有49页\编于星期一\14点 （2）流动相差别 气相色谱： 流动相为惰性气体 组分与流动相无亲合作用力，只与固定相作用 高效液相色谱： 流动相为非惰性液体,种类较多，选择余地广 流动相与组分间有亲合作用力，为提高柱的选择性、改善分离度增加了因素，对分离起很大作用 流动相极性和pH值的选择也对分离起到重要作用 选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相可以增大分离选择性 当前第36页\共有49页\编于星期一\14点 （3）操作条件差别 气相色谱： 加温操作 高效液相色谱： 室温； 高压（液体粘度大，峰展宽小） 当前第37页\共有49页\编于星期一\14点 高压输液系统 进样系统 分离系统 检测系统 记录系统 3.2 高效液相色谱仪构造 当前第38页\共有49页\编于星期一\14点 色谱基础培训自己整理实用演示文稿 当前第1页\共有49页\编于星期一\14点 （优选）色谱基础培训自己整理实用 当前第2页\共有49页\编于星期一\14点 1.1 色谱法的由来 1906年由俄国植物学家Tsweet创立植物色素分离 固定相——CaCO3颗粒 流动相——石油醚 色谱柱：玻璃管 第一章 色谱法概述 当前第3页\共有49页\编于星期一\14点 1.2 分离过程示意图 通过气相色谱分离壬烷和癸烷 样品 流动相 固定相 当前第4页\共有49页\编于星期一\14点 1.3 色谱法定义、实质和目的 定义：利用物质的物理化学性质建立 的分离、分析方法 实质：分离 目的：定性分析或定量分析 当前第5页\共有49页\编于星期一\14点 按两相分子的聚集状态分类： 流动相 固定相 类型 液相色谱 液体 固体 液-固色谱 液体 液体 液-液色谱 气体 固体 气-固色谱 气体 液体 气-液色谱 气相色谱 1.4 色谱法分类 当前第6页\共有49页\编于星期一\14点 第二章 气相色谱分析 气相色谱仪构造 气路系统 进样系统 色谱柱系统 检测器系统 数据处理系统 当前第7页\共有49页\编于星期一\14点 气相色谱仪构造 当前第8页\共有49页\编于星期一\14点 （1）对载气的要求如下： 惰性（不与样品或固定相反应） 气体扩散小，以提高柱效率 容易得到并易纯化  价格便宜 满足检测器要求 （2）载气的作用：驱动力；提供相分配空间 （3）常用载气： N2,H2,He 2.1 气路系统 当前第9页\共有49页\编于星期一\14点 （4）气体不纯的不良影响： 样品失真或消失 柱失效 对固定液保留特性的影响 对检测器的影响 （5）气体的净化方法：    多为分子筛和活性炭管的串联，可除去水、氧气以及其它杂质 2.1 气路系统 当前第10页\共有49页\编于星期一\14点 样品引入 作用：引导样品以蒸汽状态进入色谱柱。 2.2 进样系统 （1）进样器： 液体试样：微量进样器人工或自动进样 固体试样：先溶解在适当的溶剂中再用微量进样器 气体试样：可以用针筒，一般采用六通阀进样 当前第11页\共有49页\编于星期一\14点 2.2 进样系统与进样技术 （2）分流/不分流进样口 气化室： 样品在气化室中瞬间气化而不分解 分流/不分流进样模式： 分流进样 -- 含量较高组分分析 不分流进样 -- 痕