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药用植物鞣质的多元酚类化合物 这种结构通常存在于植物体内，结构比较复杂的多样性苯酚类化合物。鞣质能与蛋白质结合形成不溶于水的沉淀,故可用来鞣皮,即与动物皮革中的蛋白质相结合,使皮革成为致密、柔韧、难于透水且不易腐败的革,因此称为鞣质。 鞣质结构类型可分为三大类:水解鞣质、缩合鞣质以及缩合鞣质与水解鞣质中的葡萄糖以碳键连接而成的复合鞣质。鞣质的多元酚类结构赋予它一系列独特的化学性质,具有很强的生物和药理活性。鞣质与蛋白质有很强的结合能力,与生物碱、酶、金属离子等反应活泼,此外还有较强的表面活性,并对人体一些伤病有直接的生物疗效。因此,其在医药、食品、化妆品、制革、冶金、印染、选矿等工业上有广泛的应用。 随着鞣质研究的不断深入,对鞣质的定性定量分析提出了更高的要求,作者从鞣质的提取、分离、鉴定和含量测定方法等几个方面进行综述。鉴于鞣质的结构特征,本文着重对鞣质的通用分离和分析方法进行了归纳。 1 机溶剂提取法 鞣质的提取方法多种多样。经典的提取方法有温水浸提法、有机溶剂提取法。新型的提取方法有超声波法、微波法、超临界流体萃取、膜技术、半仿生、高压水提法等,将现代与传统技术结合,提取效率和纯度大大提高,为鞣质提供了广阔的应用前景。 2 铬分离 目前已报道的鞣质分离方法有分级沉淀法、活性炭吸附法、大孔树脂吸附法、膜分离法、离子交换法等。 2.1 沉淀来分离制度 分级沉淀是根据鞣质溶解度差别进行分离。用不同浓度的有机溶剂,如甲醇、乙醇、丙酮等分级沉淀来分离鞣质。一般采用乙醇作为溶剂。郑玲玲采用明胶沉淀总鞣质,丙酮溶液使沉淀物溶解释放鞣质,初步分离老鹳草提取液,优化工艺参数为:4%明胶溶液(10∶1)沉淀,50%丙酮溶解。有机溶剂分级沉淀法对设备要求不高,成本低,但易引入有害物质,安全性受到质疑。 2.2 活性炭杂质 活性炭是一种多孔性的含炭物质,它具有高度发达的孔隙构造,活性炭的多孔结构为其提供了大量的表面积,能与流体(杂质)充分接触,从而赋予活性炭所特有的吸附性能,使其非常容易达到吸附除掉杂质的目的。汪咏梅等利用活性炭除去单宁酸中色素、树胶等杂质,可使单宁质量分数提高1%左右,颜色和透射率则有明显改善,有助于产品总体质量的提高。 2.3 极性树脂固载 大孔树脂吸附法主要优势是针对不同的原材料可以选用不同性质的树脂,达到优化分离的目的。一般非极性物质在极性介质(水)中易被非极性树脂吸附,极性物质在非极性介质中易被极性树脂吸附,带强极性基团的吸附剂在非极性溶剂里能很好地吸附极性化合物。聚苯乙烯树脂一般适用于非极性和弱极性物质的化合物,如皂苷类和黄酮类。聚丙烯酸类树脂一般带有酯基或酰氨基,对中极性和极性化合物如黄酮醇和酚类的吸附较好。李庆等用D141大孔吸附树脂对藏边大黄鞣质进行分离纯化,D141大孔树脂的静态吸附鞣质量为27.5 mg/g。大孔树脂具有吸附选择性好、再生简便、解吸条件温和、使用周期长、易于构成闭路循环和节省费用等优点,可广泛应用于物质的分离纯化。 2.4 分离、提纯法 膜分离技术是以选择性透过膜为分离介质,当膜两侧存在某种推力(如压力差、浓度差和电位差)时,原料侧组分依据分子大小选择性地透过膜,以达到分离、提纯的目的。该方法具有高效、过程基本无相变、可在常温下运作及工艺简单、操作方便、投资省等优点,已成为一项新兴的用于澄清、分离和浓缩等方面的绿色节能技术。杜运平等采用膜分离技术优选纯化板栗苞单宁的工艺条件,研究结果表明,在最佳工艺条件下,其截留液单宁含量可达64%左右,浊度在0.8比浊度浊度单位(NTU)以下。该方法具有操作简单、高效节能、绿色环保等优点,为进一步开发单宁生产工艺提供了技术参考。 2.5 离子交换色谱 离子交换技术是根据某些溶质能解离为阳离子或阴离子的特性,利用离子交换剂与不同离子结合力强弱的差异,将溶质暂时交换到离子交换剂上,然后用适合的洗脱剂将溶质离子洗脱下来,使溶质从原溶液中分离、浓缩或提纯的操作技术。章绍兵等为获得高纯度的肽组分,依次采用离子交换色谱和凝胶过滤纯化水酶法提取工艺获得菜籽粗肽。经离子交换色谱纯化后,糖和单宁含量显著降低。 2.6 凝胶的过滤处理 凝胶柱色谱是以多孔性凝胶填料为固定相,按分子大小顺序分离样品中各个组分的液相色谱方法。用于鞣质分离的凝胶中,最常用的是Sephadex LH-20,主要针对不同聚合度鞣质的分离,分离时受每一鞣质吸附力的影响而不受凝胶过滤的影响。原花青素可以使用Sephadex LH-20柱色谱进行分离,首先用乙醇洗脱非鞣质类成分,然后用丙酮-水或乙醇-水洗脱原花青素。 2.7 高速回流色谱法hsc 近年来,在多酚类化合物的分离方面,液滴逆流色谱法(DCCC)被作为替代液相色谱技术的一种方法。优点是操作条件温和,高载样量,强分离能力,不需要固体支持剂,避免因各