农学毕业论文9篇：昆虫病原线虫共生菌毒素对水稻恶苗病菌的抑菌活性 .docVIP

农学毕业　9篇 内容提要： ? 昆虫病原线虫共生菌毒素对水稻恶苗病菌的抑菌活性 ? 衡阳县加快推进林业产业化发展 ? 伊犁地区制种玉米瘤黑粉病的发生与防治 ? 　垦区一次降水天气过程分析 ? 保定市城镇化发展中农村居民点土地集约利用研究 ? 农户生计可持续性评价理论解析及指标体系构建 ? 区域范围内农地征收补偿的博弈分析 ? 发展工业油料植物产业 实现绿色增长 ? 衡阳市野生草本植物资源及园林景观应用调查研究 全文共34887 字 昆虫病原线虫共生菌毒素对水稻恶苗病菌的抑菌活性 【摘 要】利用从全国采集的土样中收集到的２８个品系的昆虫病原线虫，分离并筛选出２８株高毒力共生菌株，对高毒力菌株的毒素进行初步提取，利用水稻恶苗病菌进行抑菌活性测定，结果表明，共生菌ＮＣ３４－３Ｂ的毒素对水稻恶苗病菌抑菌活性　，抑菌圈半径为１７．５０ ｍｍ。 关键词：昆虫病原线虫共生菌；毒素；抑菌活性 ＤＯＩ：１０．１４０８８／ｊ．ｃｎｋｉ．ｉｓｓｎ０４３９－８１１４．２０１５．０４．０２２ 收稿日期：２０１４－１１－１５ 　项目：　自然科学　项目；辽宁省教育厅项目（Ｌ２０１２２４７）；　公益性行业项目（２００８０３００１）；辽宁省大学生创新训练项目；沈阳工学院大学生创新训练项目 农业是其他生产的基础，关系到人类的生存问题，而农业中的关键问题之一就是病虫害的防治。随着可持续发展思想的出台，生物防治成为各国研究的重点。昆虫病原线虫共生菌以其杀虫迅速、对人畜　、寄主范围广、抗逆性强等优点，引起国际高度重视。随着对昆虫病原线虫共生菌研究的不断深入，共生细菌的多种生物学功能陆续被发现，其次生代谢产物具有杀虫、抑菌、抗肿瘤和杀线虫等多种生物活性，是一类新型的具有开发潜力和应用前景的生物资源［１－５］。本研究初步分离了共生菌的代谢产物，通过生物测定对不同品系昆虫病原线虫共生菌毒素的抑菌活性进行评价，为共生菌的开发利用提供基础数据和试验方法，为进一步深入研究共生菌抑菌活性提供物质基础，为开发新的生物杀菌剂提供新材料。 １ 材料与方法 １．１ 材料 供试真菌：水稻恶苗病菌。 供试昆虫：大蜡螟幼虫（Ｇａｌｌｅｒｉａ ｍｅｌｌｏｎｅｌｌａ）。 供试试剂：碱性ＥＤＴＡ溶液（NaHCO3 １０ ｇ／Ｌ；ＥＤＴＡ １ ｍｍｏｌ／Ｌ；ｐＨ ８．０）；透析袋（国产２７．７ ｍｍ，透析相对分子质量１２ ０００～１４ ０００ Ｄ）。 供试培养基：牛肉汤培养基；NA培养基；ＰＤＡ培养基；鉴别培养基。 供试线虫品系：Ａ２４，ＨＺ，ＮＣ３４，Ｏｔｉｏ，１５－２，Ｈｔ１，１，２，ＳＹ５，８，０３１００Ｃ，０３１０１Ｙ，０３１２１Ｈ，０３１２－４，０３２１－２，０３５５ＢＣ，０３５５ＤＪ，０３５６Ｈ，０３６１Ｄ，０３６２Ｗ，０３８４Ｑ，０３８５Ｄ，０３８６Ｌ，０３８９，０３９６Ｙ，０３９７Ｃ２，０３９８Ｂ，０３９９Ｈ。 １．２ 方法 １．２．１ 共生菌的分离 用昆虫病原线虫感染健康的大蜡螟５龄幼虫，虫体　后对其表面消毒，将其体液接种于鉴别培养基（ＮＢＴＡ）２８ ℃恒温箱中培养［６］，待平板上出现单菌落时，观察菌落颜色，蓝色为Ｉ型菌，红色为ＩＩ型菌［７］，挑取单菌落于ＮＢＴＡ平板上划线纯化一次，再挑取单菌落转接于ＮＡ斜面培养基，放于２８ ℃恒温箱中培养后，放到冰箱中４ ℃保存［８］。 １．２．２ 透析袋的处理 在碱性ＥＤＴＡ溶液中将透析袋煮沸１５ ｍｉｎ，用去离子水彻底清洗；然后放在１ ｍｍｏｌ／Ｌ ＥＤＴＡ（ｐＨ ８．０）中再煮沸１５ ｍｉｎ，冷却后，存放于４ ℃备用。 １．２．３ 共生菌毒素的初步提取 将菌株分别接入牛肉汤培养基中，１６０ ｒ／ｍｉｎ、２８ ℃振荡培养４８ ｈ，制成发酵液后，在冷冻离心机中（４ ℃，１０ ０００ ｒ／ｍｉｎ）离心１５ ｍｉｎ，取其上清液，加入饱和硫酸铵至８５％，４ ℃静置过夜，再于冷冻离心机中离心１０ ｍｉｎ，取其沉淀用少量去离子水溶解，在去离子水中透析４８ ｈ，期间多次更换去离子水，彻底去除溶液中的硫酸铵，再将菌液放入冷冻干燥机中冷冻干燥４８ ｈ，所得干粉即毒素的粗提物，于－２０ ℃保存，备用。生物测定时将毒素溶于去离子水中配成５ ｍｇ／ｍＬ即为供试样品。 １．２．４ 共生菌毒素对水稻恶苗病菌的抑菌试验 将灭菌后的直径为６ ｍｍ的小圆滤纸片在供试样中浸润５ ｍｉｎ后，放入ＰＤＡ培养基平板中心，将水稻小斑菌分４块放在滤纸片的四周，距培养皿边沿２ ｃｍ 处。每平板为１个重复，每处理设３个重复，设置去离子水为对照，放置于２７ ℃恒温培养箱中培养，５ ｄ后测量抑菌圈大小，对各数据用ＳＰＳＳ１７版统计分析软件进行单因素方差分析。 ２ 结果与分析 由表１可知，２８个品系共生菌菌株的毒素对水稻恶苗病菌均有抑菌活性。经ＳＰＳＳ分析