菌落总数的测定方法验证报告.pdfVIP

方法验证报告 方 法 验 证 报 告 公共场所集中空调通风系统卫生规 集中空调送风中细菌总数 WS 394-2012 附录D 方法验证报告 1. 目的 验证培养法测定集中空调系统送风中的细菌总数指标，来判断在本实验室此 方法的适用性。 2.方法内容 2.1 细菌总数 集中空调系统送风中采集的样晶，计数在营养琼脂培养基上经35 ℃~37 ℃、 48 h 培养所生长发育的嗜中温性需氧和兼性厌氧菌落的总数。 2.2 设备和器材 2.2.1 六级孔撞击式微生物采样器。 2.2.2 高压蒸汽灭菌器。 2.2.3 恒温培养箱。 2.2.4 平皿：Φ90mm 。 2.3 培养基 2.3.1 营养琼脂培养基成分：、 蛋白胨 10g 氯化钠 5g 内膏 5g 琼脂 20g 蒸馏水 1000Ml 2.3.2 制法：将蛋白胨、氯化钠、肉膏溶于蒸馏水中，校正pH 为7.2~7.6 ，加入 琼脂，121 C，20 min 灭菌备用。 2.4 采样 2.4.1 采样点：每套空调系统选择3 个~5 个送风口进行检测，每个风口设置1 个 检测点，一般设在送风口下方15 cm~20 cm、水平方向向外50 cm~100 cm 处。 2.4.2 采样环境条件：采样时集中空调系统必须在正常运转条件下，并关闭门窗 15 min~30 min 以上，尽量减少人员活动幅度与频率，记录室内人员数量、温湿 度与天气状况等。 2.4.3 采样方法：以无菌操作，使用撞击式微生物采样器(D.3.1) 以28.3 L/min 流量 采集5 min~ 15 min。 1 方法验证报告 2.5 检验步骤 将采集细菌后的营养琼脂平皿置35 ℃~37℃培养48 h ，菌落计敷。 2.6 结果报告 2.6.1 送风口细菌总数测定结果：菌落计数，记录结果并按稀释比与采气体积换 3 算成CFU/m (空气中菌落形成单位每立方米) 。 2.6.2 集中空调系统送风中细菌总数测定结果：一个系统送风中细菌总数的测定 结果按该系统全部检测的送风口细菌总数测定值中的最大值给出。 3.方法验证结果 3.1 空白实验 对灭菌蒸馏水7 次做细菌总数的测定，所得结果如下表： 表1 空白试验结果 3 序号 样品分析编号 平皿菌落数 结果（CFU/m ） 1 灭菌蒸馏水-1 0 未检出 2 灭菌蒸馏水-2 0 未检出 3 灭菌蒸馏水-3 0 未检出 4 灭菌蒸馏水-4 0 未检出 5 灭菌蒸馏水-5 0 未检出 6 灭菌蒸馏水-6 0