薄层色谱扫描法的定量方法 .docxVIP

PAGE PAGE 1 薄层色谱扫描法的定量方法 薄层扫描仪定量的依据是，在一定的范围内，峰面积与斑点中的量（或点样量）成直线关系。在薄层色谱扫描仪上用合适的测定参数通过对被分别物质斑点的扫描，并将被分别物质斑点的面积值与已知对比品斑点面积值比较，可以计算出样品中被测成分的含量。利用薄层色谱仪举行定量分析的办法主要采纳外标法和内标法。其中外标法最为常用，包括外标一点法和外标二点法。 外标法即同时在板上点已知浓度的。当工作曲线是通过原点的直线时，选用点一种浓度的标准品称为外标一点法，此时工作曲线方程为c=bA；当工作曲线不通过原点时，选用凹凸两种浓度的对比品溶液点在薄层上称为外标两点法，此时工作曲线方程为c=a+bA。外标一点法是采纳一个浓度的对比品，同时在板上分离点样斑3-4个和对比品斑点3-4个，测得各自峰面积，并求出平均值，再计算样品含量，其公式为：c样/c标=A样/A标式中c样，c标——样品量及对比品量；A样，A标——样品及对比品的峰面积。外标两点法是用两种浓度的对比品溶液或一种浓度两种点样量与样品溶液对照定量。样品中组分的量为：c样＝a＋bA样b＝（c1一c2）/(Al-A2)a＝c1一bA1式中c1，c2——对比品的两个点样量（或浓度）；A1,A2,A样——样品及对比品的峰面积。内标法与外标法的不同之处是，内标法是在被测溶液中加入一种在被测样品溶液中不存在的、性质与被测物质类似且又简单与被测物质分别的纯化合物，然后通过被测样品和内标物的面积之比举行定量。普通来说因为内标物质的挑选比较困难，此法在实际的定量分析中运用较少。