4.4核酸的性质园艺植物生物技术.pdf

4.4 核酸的性质 4.4.1 紫外吸收的特性 嘌呤和嘧啶在260 nm有特异的吸收峰, 这个性质用于核酸 的分析 4.4.2 溶解性 溶于偏碱的溶剂中，可以为乙醇沉淀，容易受机械作用 力而断裂。 4.4.3 黏性 DNA溶液有高度的黏性 4.4.4 DNA分子的变性(Denaturation） DNA双螺旋的有序结构受各种理化因子，如热、酸碱、 变性剂、有机溶剂以及稀释的作用，转变为无规则的线团 结构。 变性的特征： 增色效应 (hyperchromic effect), 黏度下降， 沉降系数增加，生物学活性丧失 热变性和Tm值 增色效应：核酸分子加热变性时，其 在260nm处的紫外吸收急剧增加的现象。 Tm值 ：当紫外吸收变化达到最大变 化的半数值时，此时所对应的温度 称为熔解温度、变性温度或用Tm值 表示 DNA解链曲线 影响Tm值的因素 1.溶液的性质 2.DNA的性质和组成 大肠杆菌DNA在不同浓度KCl溶液下的熔融温度曲线 4.4.5 复性 （renaturation） 复性：变性DNA 分开的 两条链在适当条件下重 新生成双链结构的过程 退火 （annealing）:热变 性的DNA 经缓慢冷却后 复性的过程 4.4.6 分子杂交 （molecule hybridization） 当两条不同来源的DNA （或RNA）链 或DNA链与RNA链之间存在互补顺序时， 在一定条件下可以发生互补配对形成双 螺旋分子，这种分子称为杂交分子。形 成杂交分子的过程称为分子杂交 核酸探针（nucleic acid probe）: 能特异性的探测带某一特定序列的DNA 或RNA分子的标记核酸分子。 4.4.7 分子杂交技术的应用 利用探针(probe),可以 研究DNA之间的亲缘关系； 发现基因的缺失或突变； 测定某种遗传信息的量； 鉴定某种基因等 以分子杂交为基础建立起的分子生物学研究技术有： 用于鉴定DNA的Southern印迹技术 用于鉴定RNA的Northern印迹技术 原位杂交技术 基因芯片技术等 (DNA点阵 DNA array ） ( DNA芯片 DNA chip) 将在第17章中介绍 本章小结 * DNA和RNA在细胞内的分布和特点 * A 、T 、G 、C和U 的化学结构及其与核糖或脱氧核 糖的连接方式；核酸中核苷酸的连接方式（3’,5’-磷 酸二酯键），多聚核苷酸的表示法 * DNA双螺旋结构的内容要点；碱基互补配对原则及 其生物学意义；DNA的超螺旋结构 *核酸的理化性质；DNA变性（Tm）、影响Tm的因 素，复性、分子杂交、探针等概念 * RNA的类型、作用和结构特点 本章结束