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2021-02-06 发布于河北
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pcr反应体系组分适合浓度范围.docx

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核基因PCR反应体系30?μL，包括20?ng模板DNA、0.75?U?PrimeSTAR? HS?DNA?Polymerase(+100?μM?MgCl2)?(Takara),?0.20?μM?双向引物、200?uM?dNTP,?4%?(v)?DMSO,?0.23?mg/ml?BSA?(BioLabs),?1×PCR?buffer；叶绿体DNA区段PCR反应总体系为30?μL，包括20?ng模板DNA,?0.75?U?Premix?TaqTM?DNA?Polymerase(+250?μM?each?dNTP,?100?μM?MgCl2)?(Takara)、0.20?μM?双向引物叶绿体DNA区段PCR反应总体系初始浓度加样量 /30 μl 终浓度合适浓度 dH2O 12.8ul Premix TaqTM DNA Polymerase(1.25U/25ul) 15ul 0.75U ? Primer 1(10uM) 0.6ul 0.2uM 0.1-0.5uM Primer 2(10uM) 0.6ul 0.2uM 0.1-0.5uM DNA 1ul 20ng 单位换算：1M=1mol/L=1mmol/ml=1umol/ul=1nmol/nl, 10uM=10umol/L 核基因PCR反应体系初始浓度加样量 /30ul 终浓度合适浓度 dH2O 17.2ul 5x PrimeSTAR Buffer(Mg2+ plus) 6ul 1× dNTP Mixture(各2.5mM) 2.4ul 200?uM 20-200uM DMSO(100%) 1.2ul 4% 5-10% BSA(10mg/ml) 0.7ul 0.23?mg/ml ? Primer 1(10uM) 0.6ul 0.2uM 0.1-0.5uM Primer 2(10uM) 0.6ul 0.2uM 0.1-0.5uM ?PrimeSTAR? HS?DNA?Polymerase(2.5U/ul) 0.3ul 0.75U ? DNA 1ul 20ng pcr组分合适浓度范围的早期版本——刘老师