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果蔬采后生理生化实验指导 曹建康，姜微波，赵玉梅编著 中国农业大学 录 I II III 第一篇 基本实验操作原理 一、仪器的清洗、干燥和保管 仪器的清洗，是一项细致的实验准备工作，实验中所用的仪器清洁与否，洗 涤是否符合要求，对实验结果的准确性和精确程度均具有直接的影响。在果蔬采 后生理生化实验中，经常涉及到蛋白质、酶甚至核酸等多种具有生物活性的物质 的测定和制备工作。这些物质对许多常见的污染杂质如金属离子（钙、镁离子等）、 去污剂和有机物残基等十分敏感。由于实验仪器不洁净或被污染，往往会造成生 化实验出现较大的误差，有时甚至导致实验的失败。因此，实验仪器、用具是否 洁净就是非常重要的。 1．仪器的清洗 （1）初用玻璃仪器的清洗 新购买的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性物质，可先用 0.5% 的去污剂洗 刷，再用自来水洗净后浸泡在 1%~2%盐酸溶液中过夜（不可少于 4 小时），再用 自来水冲洗。清洗后的器皿内外不可挂有水珠，否则重新洗净。最后，用去离子 水冲洗两次，在 100~120 ℃烘箱内烘干备用（计量仪器不可烘干）。 （2 ）使用过的玻璃仪器的清洗 先用自来水将仪器中的污染物洗刷干净，再用合适的毛刷沾去污剂（粉）洗 刷，或浸泡在 0.5% 的清洗剂中超声清洗（比色皿决不可超声清洗），然后用自来 水彻底洗净去污剂，用去离子水洗涤两次，烘干备用。 （3 ）石英和玻璃比色皿的清洗 强碱会浸蚀抛光的比色皿，因此在清洗时决不可用强碱清洗。可用洗液或 1%~2%的去污剂浸泡后，再用自来水和去离子水冲洗。用绸布包裹的小棒或棉 花球棒刷洗，效果会更好。 （4 ）塑料器皿的清洗 塑料器皿一般由聚乙烯、聚丙烯等材料制成，在实验中的应用越来越多。第 一次使用塑料器皿时，可先用 8 mol/L 尿素（用浓盐酸调 pH = 1 ）清洗，接着依 - 1 - -3 次用去离子水、1 mol/L KOH 和去离子水清洗，然后用 10 mol/L EDTA 除去金 属离子的污染，最后用去离子水彻底清洗，以后每次使用时，可只用 0.5% 的去 污剂清洗，然后用自来水和去离子水洗净即可。 2 ．洗液的配制 洗液的种类较多，根据需要，可以配置不同的洗液。 （1）铬酸洗液：常用铬酸洗液清洗新购买的玻璃仪器，以除去玻璃表面附 着的碱性物质。但是铬有致癌作用，毒性较大，配制和使用洗液时要极为小心， 常用两种配制方法如下： 方法一：取 100 mL 工业浓硫酸置于烧杯内，小心加热，然后慢慢加入 5 g 重铬酸钾粉末，边加边搅拌，待全部溶解并缓慢冷却后，贮存在磨口玻璃塞的细 口瓶内。 方法二：称取 5 g 重铬酸钾粉末，置于 250 mL 烧杯中，加 5 mL 水使其溶 解，然后慢慢加入 100 mL 浓硫酸，溶液温度将达 80 ℃，待其冷却后贮存于磨 口玻璃瓶内。 （2 ）工业浓盐酸：可洗去水垢或某些无机盐沉淀。 （3 ）5%草酸溶液：用数滴硫酸酸化，可洗去高锰酸钾的痕迹。 （4 ）30%硝酸溶液：洗涤二氧化碳测定仪及微量滴管。 （5 ）5%~10% 乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na ）溶液：加热煮沸可洗脱玻璃 2 仪器内壁的白色沉淀物。 （6 ）尿素洗涤液：为蛋白质的良好溶剂，适用于洗涤盛过蛋白质制剂及血 样的容器。 （7 ）有机溶剂：如丙酮、乙醚、乙醇等可用于洗脱油脂、脂溶性染料污痕 等；二甲苯可洗脱油漆的污垢。 （8 ）市售洗涤剂：可洗涤油污物。 3 ．器皿的干燥 用于不同实验的仪器对干燥有不同的要求，一般定量分析中的烧杯、锥形瓶 等仪器洗净即可使用，而用于