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?从红辣椒中分离红色素
一.实验目的
1.??学习用薄层色谱和柱色谱方法分离和提取天然产物的原理。
2.??复习柱色谱的操作方法。
二.实验原理
红辣椒含有多种色泽鲜艳的天然色素,其中呈深红色素主要是由辣椒红脂肪酸酯和少量辣椒玉红素脂肪酸酯所组成,呈黄色的色素则是-胡萝卜素。
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这些色素可以通过色谱法加以分离。本实验以二氯甲烷作萃取剂,从红辣椒中提取红色素。然后采用薄层色谱分析,确定各组分的再经柱色谱分离,分段接收并蒸除溶剂,即可获得各个单组分。
三.实验装置
如图3-13回流装置,图2-20柱色谱装置,图2-18计算值示意图所示。
四.实验试剂与器材
试剂:干燥红辣椒、二氯甲烷、硅胶G(200~300目)、沸石。
器材:圆底烧瓶、球形冷凝管、布氏漏斗、吸滤瓶、广口瓶、3cm*8cm薄板、点样毛细管、色谱柱、锥形冷凝管。
五.实验步骤
在50mL圆底烧瓶中,放入1g干燥并研碎的红辣椒和2粒沸石,加入10ml二氯甲烷,装上回流冷凝管,加热回流20min。待提取液冷却至室温,过滤,除去不溶物,蒸发滤液,收集色素混合物。
以200ml广口瓶作薄板色谱槽、二氯甲烷作展开剂。取极少量色素粗品置于小烧杯中,滴入2~3滴二氯甲烷使之溶解,并在一块硅胶G薄板上点样(铺板、活化、点样、色谱分离参见2.3.6一节),然后置入色谱槽进行色谱分离。计算各种色素的值。
在1.5cm的色谱柱中,装入硅胶G吸附剂(参加2.3.6一节),用二氯甲烷作洗脱剂,将色素粗品进行柱色谱,收集各组分流出液,浓缩各组分,得到各组分产品。
六、注意事项
1.???????红辣椒要干且研细。
2.???????硅胶G薄板要铺得均匀,使用前活化充分。
3.???????色谱柱要装结实,不能有断层。
七、实验结果与讨论
????????通过薄层色谱可得到各组分的值,再通过柱色谱,分段浓缩可得到不同的组分。
八、思考题
1.???????硅胶G薄板失活对结果有什么影响?
2.???????点样时应该注意什么?点样毛细管太粗会有什么后果?
3.???????如果样品不带色,如何确定斑点的位置?举1~2个例子说明。
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