培养体系对维持人脐带间充质干细胞特性及其体外扩增效率的影响.docVIP

www.CRTER www.CRTER.org 孙亚如，等. 培养体系对维持人脐带间充质干细胞特性及其体外扩增效率的影响 www.CRTER www.CRTER.org 孙亚如，等. 培养体系对维持人脐带间充质干细胞特性及其体外扩增效率的影响 PAGE 2024 P.O. Box 10002 PAGE 3 P.O.Box 1200,Shenyang www.CRTER.org中国组织工程研究 第21卷 第13期 2017–05–0 www.CRTER.org Chinese Journal of Tissue Engineering Research May 8, 2017 Vol.21, No.13 · ·研究原著· PAGE 2023 ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH 培养体系对维持人脐带间充质干细胞特性及其体外扩增效率的影响 孙亚如，张炳强，王福斌，许 评，王二朴，李翠翠(青岛市立医院卫生部细胞移植重点实验室临床中心，山东省青岛市 266000) 引用本文：孙亚如，张炳强，王福斌，许评，王二朴，李翠翠. 培养体系对维持人脐带间充质干细胞特性及其体外扩增效率的影响[J].中国组织工程研究，2017，21(13):2023-2028. DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2017.13.010 ORCID: 0000-0002-7756-9487(孙亚如) 文章快速阅读： 不同培养体系中人脐带间充质干细胞的特性及体外扩增效率 不同培养体系中人脐带间充质干细胞的特性及体外扩增效率 消化传代培养14 d后：比较各培养体系对人脐带间充质干细胞形态、表面标记物、分化及增殖能力的影响 消化传代培养14 d后： 比较各培养体系对人脐带间充质干细胞形态、表面标记物、分化及增殖能力的影响。 6组培养体系： MesenCult无血清完全培养基中添加2%人血小板裂解液；StemPro无血清完全培养基中添加2%人血小板裂解液；MesenCult无血清完全培养基； StemPro无血清完全培养基； 低糖DMEM中添加体积分数10%胎牛血清； 低糖DMEM中添加10%人血小板裂解液。 结果表明： 无血清和人血小板裂解液相结合的培养基能较好地维持间充质干细胞的特性及扩增效率。 原代培养： 原代培养：脐带间充质干细胞 文题释义： 脐带间充质干细胞的特性：脐带来源间充质干细胞的原始丰度高于骨髓、骨膜、胎盘来源间充质干细胞，其数量依然需要经过体外数代扩增才能达到临床应用的需求。然而，脐带间充质干细胞并非永生化的干细胞，在多次传代后，会随扩增的数量增多而逐渐分化，最终丧失干细胞特性，进而失去治疗功能。因此选择能最大限度维持干细胞特性及高扩增效率的培养体系至关重要。 无血清培养体系：是一种无任何血清成分，通过像鸡尾酒式的添加营养成分和生长因子就可以维持间充质干细胞在体外生长繁殖的培养体系。它不仅能够避免异种血清可能对细胞带来的异源性污染，而且较胎牛血清和人血小板裂解液培养体系在细胞增殖效率方面有较大提升。尽管如此，实验数据显示单独应用无血清培养体系作为临床级脐带间充质干细胞的培养体系尚有其不足之处：细胞在无血清培养体系中随传代次数递增容易出现分化，难以维持干细胞的特性；随传代数次递增扩增效率显著下降。 摘要 背景：前期数据显示，应用人血小板裂解液培养体系对人脐带间充质干细胞进行体外培养时，较无血清培养体系能更好地维持干细胞特性，而无血清培养体系相较于人血小板裂解液培养体系能一定程度上提高间充质干细胞的体外增殖能力。 目的：筛选能最大限度维持人脐带间充质干细胞特性及扩增效率高的培养体系。 方法：将6份人脐带标本分别接种于6种培养体系中，进行脐带间充质干细胞原代培养，6种培养体系分别为MesenCult无血清完全培养基中添加2%人血小板裂解液(A组)、StemPro无血清完全培养基中添加2%人血小板裂解液(B组)、MesenCult无血清完全培养基(C组)、StemPro无血清完全培养基(D组)、低糖DMEM中添加体积分数10%胎牛血清(E组)、低糖DMEM中添加10%人血小板裂解液(F组)，14 d后进行消化传代培养，比较各培养体系对人脐带间充质干细胞形态、表面标记物、分化及增殖能力的影响。 孙亚如，男，1983年生，山东省青岛市人，汉族，2007年英国谢菲尔德大学毕业，硕士，主要从