乙型肝炎标志物检测及质量控制.ppt

* 室间质评： 如参加卫生部临检中心及省临检中心的室间质评。 室内质控： 1、原厂质控品 2、第三方质控品：从卫生部临检中心及省临检中心购买；商品化质控品 3、自制：利用试剂盒内的阴阳性对照或患者的血清进行配置 质控品来源 * 定性、半定量与定量项目的质量控制 定性试验：报告“阴性-”或者“阳性+”的试验。 半定量试验：报告“x+”、“阴性-”或者“滴度”的试验。 定量试验：报告定量检测项目的试验。 质量控制 * 常见定性、半定量及定量试验的检测报告方式 定性检测 肉眼判读结果，无法（需）读取检测信号大小（强弱），直接报告阴阳性的。如：ENA抗体、金标法项目、免疫印迹法项目。 仪器判读连续检测信号，使用Cut-off判断阴阳性的。如：ELISA、发光仪等。 半定量检测 肉眼或者仪器判读，判别颜色强弱并报告“x+”或报告稀释度的。如：尿干化学、凝集试验。 定量检测 * 定性、半定量及定量项目的质控方法 定性检测：直接报告阴阳性的 注意“质控品”与“阴阳性对照”的区别。 需要阴性和阳性质控各一。最好有弱阳性质控。 无法统计质量控制，但须回顾性统计符合率。 定性检测：以Cut-off值报告阴阳性结果的。 用阴性质控、弱阳性质控（如不可取得，只用阳性质控）来控制。夹心法弱阳性质控的S/CO约为1.5-4，视不同方法而定，如竞争法：S/CO约为0.5-0.9。 用“符合度”判断质控情况。 用L-J图控制精密度：定性sAg、sAb、eAg CV%15%左右。eAb、cAb CV%20% 定量sAg 、sAb10% * 定性、半定量及定量项目的质控方法 半定量检测：报告“x+”或稀释度的 选择阴性和适中浓度质控品。如2+。1+~3+为在控。 无法统计质量控制，但须回顾性统计各结果比率。 定量检测 使用定量质控方法 * 定性项目质控还因注意的几个问题 质控判断和精密度控制分开。 推荐用S/CO值建立均值、SD、CV%。因为有些读数值很低的项目是不符合相应统计要求的。如过低值的CV%会很大。 加心法使用弱阳性和阳性统计。竞争法用阴性和弱阳性统计。避开极低的S/CO。 最好附加极高值质控排除钩状效应。 * 乙肝标志物质量控制 主要包括三个方面： （1）测定前的质量控制； （2）统计学质量控制； （3）质量控制的评价。 * 测定前的质量控制 实验室设施、仪器设备及管理 理想的试剂和操作方法 人员培训 * 实验室设施、仪器设备及管理 实验室空间及工作流程的设计 实验室环境条件的控制：温湿度控制设备、稳压或不间断电源 仪器设备及管理：酶标仪、洗板机、全自动免疫分析仪、加样器等应建立技术档案，并定期维护和校准 * 理想的试剂 试剂的质检(确认) 测定下限(Detection limit) 批内变异(10%)和批间变异(15-20%) “钩状”效应(Hook effect) 变异体的检测能力(HBsAg) 对本室所用室内质控血清检测的一致性 * 理想的操作方法 按照试剂盒说明书操作即可吗? 操作中影响测定结果的关键环节 写出具有可操作性的SOP * 人员培训 培训所涉及的范围:仪器设备使用、维护和校准；试剂、方法原理；质量管理体系；相关法律法规、相关领域的新技术、新理念和新进展；实验操作技能等。 如何培训：讲座、讨论、自学和参加培训班等。 培训的评估：书面考试、实验考核、讨论心得、论文、综述等。 对培训者的评估：培训者的背景、资历、在相关领域内的成就、所接受过的相关领域外部培训情况等。 * 统计质控方法 定性免疫测定质控物浓度的选择 室内质控物的质检(确认) 每块板质控物的数量 质控规则 Levey-Jennings质控图方法 * 定性免疫测定质控物浓度的选择 可选择S/CO值减去精密度测定中得到的三倍批间CV（通常的ELISA测定批间变异（CV%）在15%左右）与该S/CO值的乘积（意即三倍SD）仍大于1的质控血清作监测重复性的室内质控用 计算公式：S/CO（1-3CV%）=S/CO-3SD S/CO比值可在1.5～4之间。 同时选择S/CO处于1.0～1.5左右的质控血清以判断每次测定时试剂盒测定下限的有效性。 * 室内质控物的质检(确认) 使用前的质检：检测的S/CO比值是否合适、与前一批质控物的S/CO比值的比较 使用中的确认：质控物的稳定性、批与批质控物的一致性 * 每块板质控物的数量及位置 空白 2份弱阳性质控 2～3份阴性质控 2～3份阳性质控 随机放置于血液标本中间 * 质控规则的表达方式及定义 质控规则的表达方式 质控规则的功能 常用质控规则的符号