高三生物复习资料实验1-大肠杆菌的培养和分离.ppt

（主要以二分裂方式进行） 异养需氧型 异养厌氧型 自养需氧型 自养厌氧型 革兰氏染色：细菌经紫色的革兰氏染液染色后，再用酒精脱色，可把细菌分为两大类：仍被染成紫色的即为革兰氏阳性菌(G+)和脱去染色的为革兰氏阴性菌(G-)。这两种细菌的差别在于细胞壁的成分不同。 实验小结——操作细节的思考 下列关于微生物培养基的说法中，正确的是 A.同一种物质不可能既作碳源又做氮源 B.凡是碳源都能提供能量 C.除水以外的无机物仅提供无机盐 D.无机氮也能提供能量 * 选修1 《生物技术实践》 微生物的利用 酶的应用 果酒的制作 泡菜的腌制 植物组织培养 选修1 《生物技术实践》 实验1 大肠杆菌的培养与分离 实验2 分离以尿素为氮源的微生物 实验4 果汁中的果胶与果胶酶 实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 实验8 果酒及果醋的制作 实验10 泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定 实验11 植物的组织培养 浙科版 人教版 第一部分 微生物的利用 一、微生物的类群 微生物是指结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物，包括病毒、原核生物、原生生物和某些真菌。 大约有10万种微生物，多数微生物对人类是有益的！ 任务1：请将中学阶段涉及的微生物进行分类。 T2噬菌体、烟草花叶病毒、流感病毒、HIV病毒、劳氏肉瘤病毒 大肠杆菌、乳酸菌、枯草杆菌、醋酸杆菌、 肺炎双球菌、霍乱弧菌、幽门螺旋菌、放线菌、 支原体、蓝细菌、酵母菌、青霉菌、黑曲霉、 食用菌 草履虫、变形虫、伞藻、绿藻、金鱼藻、衣藻、 结构 细胞壁 细胞膜 细胞质 拟 核 特殊的结构 二、细菌——单细胞原核生物 形态：杆形、球形、弧形、螺旋形 荚膜 鞭毛 芽孢 主要成分是肽聚糖，可被某些溶菌酶水解，青霉素能抑制其合成。 唯一的细胞器：核糖体。 质粒：小型的环状DNA分子，控制抗药性等性状。 由一个大型的环状DNA反复折叠缠绕而成,控制着细菌的主要遗传性状。 细菌生长到一定阶段产生的一种抗逆性很强的休眠体、具厚壁，以度过不良的环境。 主要成分为多糖，与其致病性有关。 由蛋白质组成，与运动有关。 细菌的繁殖方式 菌落可以作为菌种鉴定的重要依据。 菌落：单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖形成的肉眼可见、有一定形态结构的细胞群。 单菌落：单个细菌在固体培养基上大量繁殖形成的独立的单个菌落。 细菌的鉴定——菌落和单菌落 大多数细菌的代谢类型属于什么方式 ? 在生态系统中处于什么地位 ? 分解者或消费者 生产者 菌落在生态学上属于什么单位 ？ 大肠杆菌是革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌。 实验1 大肠杆菌的培养和分离 由于易培养、繁殖快，被广泛用于基因工程。如何扩大培养？如何从可能污染的菌群中分离大肠杆菌并保存？ 知识要点 培养基的分类和成分 无菌技术：消毒、灭菌 两种分离纯化的方法 培养基的分类和成分 根据物理性质分类： 常用于工业生产及扩大培养等 无 液体培养基 用于微生物的分离、鉴定、计数等 有 固体培养基 用途 凝固剂（琼脂） 根据培养基的用途分类： 加入某种指示剂或化学药品 加入某种化学物质： 抑制不需要的微生物生长， 或满足所需要微生物的特殊营养要求 用途 伊红和美蓝 →鉴别大肠杆菌 鉴别培养基 加青霉素→分离到酵母菌和霉菌 以尿素为唯一氮源→分离到以尿素为氮源的微生物 选择培养基 例 如何分离固氮菌？分离自养型微生物？ 培养基的分类和成分 培养基是适合微生物生长繁殖的营养基质，一般包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子。 无 无 铵盐、硝酸盐 CO2、NaHCO3等碳酸盐 无机盐 水 自养 微生物培养 无 特殊添加物 生长因子 氮源 碳源 无机盐 无机盐 无机盐 水 水 水分 异养 植物组织培养 糖类：葡萄糖、蔗糖、淀粉等；蛋白质、核酸类：牛肉膏、蛋白胨、花生粉饼、明胶、氨基酸等 牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等 酵母提取液、豆芽汁类：维生素、酶、碱基等 蔗糖等有机物 氨基酸等小分子有机物 维生素类 生长素、细胞分裂素 培养不同的微生物，所需成分、酸碱度不同：“细菌喜荤，霉菌喜素”；细菌中性偏碱，霉菌中性偏酸。 灭菌是指用强烈的理化方法 ，杀死一定环境中所有微生物的细胞、芽孢和孢子。 消毒是指用较为温和的理化方法 ，杀死部分微生物，不杀死芽孢和孢子 。 （1）煮沸消毒法（100℃煮沸5-6min）：一般物品 （2）巴氏消毒法（70-75 ℃ 煮30min）：不耐高温的液体，如牛奶 （3）化学药剂消毒法（ 70%~75%酒精）：擦拭双手 （1）灼烧灭菌法（酒精灯火焰）：接种环，操作时试管口 （2）干热灭菌法（160-170℃1-2h）：其他金属工具 （3）高压蒸汽灭菌法（1kg/cm2的压力下，121℃15min ）：培养基及试管、培养皿、三角瓶等