质谱技术在微生物鉴定和生物医学中的应用PPT.ppt

micrOTOFQ Dry Gas Heater Orthogonal Accelerator Glass Capillary Collision Gas Supply Hexapole 电喷雾离子源 去溶剂系统 飞行管 检测器 反射镜 离子聚焦系统 离子漏斗式传输 四级杆Q 碰撞池 布鲁克公司独家专利设计： 离子漏斗式传输系统 离子流方向 离子传输率大大提高，从而提高灵敏度。 增宽传输离子质量范围 离子流方向 传统的锥式离子传输 micrOTOFQ适用范围： 电喷雾四级杆飞行时间串联质谱仪 分子式测定和分子结构鉴定： 如：化学合成产品，配位化合物，天然产物，代谢物，残留农药等 大分子研究 如：蛋白质/多肽，多糖，多聚物等 复杂混合物分析 精确质量 (3ppm) micrOTOFQ：独特的三维信息 MS/MS提供结构信息 电喷雾四级杆飞行时间串联质谱仪 SigmaFit?参数（同位素峰形匹配） 精确质量 (3ppm) micrOTOFQ：独特的三维信息 MS/MS提供结构信息 电喷雾四级杆飞行时间串联质谱仪 SigmaFit?参数（同位素峰形匹配） C254H383N65O75S6 ,5735.65 0 2000 4000 6000 Intens. 1146.0 1146.5 1147.0 1147.5 1148.0 1148.5 1149.0 1149.5 1150.0 m/z 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 模拟同位素分布峰形 SigmaFit?参数—— 同位素峰形的匹配 2 1 3 4 5 6 7 8 9 10 11 C254H383N65O75S6 ,5735.65 0 2000 4000 6000 Intens. 1146.0 1146.5 1147.0 1147.5 1148.0 1148.5 1149.0 1149.5 1150.0 m/z 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 模拟同位素分布峰形 实测同位素分布峰形 SigmaFit?参数—— 同位素峰形的匹配 SigmaFit 参数 =0 SigmaFit 参数 0 电离源 质谱仪中产生离子的装置称为离子源(ion source)。电离源的功能是将进样系统引入的气态样品分子转化成离子。由于离子化所需要的能量随分子不同差异很大，因此，对于不同的分子应选择不同的离解方法。通常称能给样品较大能量的电离方法为硬电离方法，而给样品较小能量的电离方法为软电离方法。 质谱技术中的几种离子源 基质辅助激光解吸离子化 (Matrix Assisted Laser Desorption Ionization，MALDI) 2. 电喷雾离子化(Electrospray ionization，ESI) Sample target Ion optics Linear detector Laser MALDI-TOF MALDI: 线性工作原理 Mix matrix sample on target Fire laser at matrix/sample Ionize sample (solid to gas phase) Accelerate / extract ions Separate ions in analyzer Record spectrum at detector Time of flight (TOF) mass analyzer (field free) 0 20 40 60 80 100 10000 20000 30000 40000 m/z +ve mode [M+H]+ ions 质谱仪的基本结构 一、真空系统 质谱仪的离子产生及经过系统必须处于高真空状态(离子源真空度应达1.3×10-4 - 3×10-5 pa，质量分析器中应达1.3×10-6 pa)。若真空度过低，则会造成离子源灯丝损坏、本底增高、副反应过多，从而使图谱复杂化、干扰离子源的调节、加速极放电等问题。一般质谱仪都采用机械泵预抽真空后，再用高效率扩散泵连续地运行以保持真空。 图5.1 质谱仪的构成 微生物鉴定方法 感官 视觉, 嗅觉, 味觉 免疫 单或多克隆抗体 分子 PCR…… 生化 代谢能力和耐抗生素 耗时 气质法（GC-MS） 脂肪酸，小分子糖 MALDI-TOF MS * * 微生物鉴定新方法（MALDI TOF） 比现有方法鉴定更多生物