脂质体的应用与备脂质体的应用与制备.ppt

脂质体应用及其制备 卢铭辉 20110006015 脂质体—结构 英国科学家庞汉姆等在 1965 年进行生物膜 研究时，发现磷脂分子在水中分散后能够自 发的形成一种囊泡体，这种囊泡体具有类似 于细胞膜的双分子层结构，他将这种囊泡体 称为脂质体。 20世纪70年代初用脂质体作为药物载体包 埋淀粉葡萄糖苷酶治疗糖原沉积病首次获 得成功后, 脂质体便引起了广泛关注。 磷脂分子具有一个亲水的极性头部和一个 疏水的非极性尾部，因此在组成脂质体时， 磷脂的亲水极性头部位于脂质体双分子层 的外部，疏水的非极性尾部朝向脂质体双 分子层的中间。 脂质体( liposome)是单层或多层脂质双分 子膜以同心圆的形式包封而成,类似细胞膜 的微球体。 脂质体按照不同的直径大小以及内囊数目可分为以下几种类 型： √直径小于100nm 的小单层脂质体(SUV) √直径大于100nm 的大单层脂质体(LUV) √多层同心的多层脂质体(MLV) √非同心多囊泡脂质体(MVL) 脂质体—分类应用 √长循环脂质体 长循环脂质体是指经过修饰作用的具有一定空间稳定性的脂质体， 常见的修饰物有聚乙二醇（PEG）、神经节苷脂（GM1）等。因其具有空 间稳定性，所以长循环脂质体可在体内长时间驻留，进而使药物的作用 时间得到延长，发挥出长效作用。 GM1能够增强脂质体膜的刚性，减少单核吞噬细胞系统（MPS）对长 循环脂质体的吞噬率。 PEG可以在脂质体的表面产生空间位阻层，以使长循环脂质体不被内 皮网状系统（RES）吞噬，进而延长药物作用时间。 √热敏脂质体 热敏脂质体又叫温度敏感脂质体，其所使用的磷脂具有比人体体温 稍高的相变温度，在当环境温度达到相变温度时，脂质体双分子层会由 “胶晶态”转变为膜流动性更强的“液晶态”，从而促使脂质体所包封 药物的释放率加大。 在研究中，有学者提出将肿瘤等病灶部位升温，使局部温度能够高 于热敏脂质体的相变温度，可以使抗肿瘤药物在肿瘤病灶部位快速释放， 来提高脂质体的靶向治疗作用。 热敏脂质体已被广泛的应用于核酸、抗生素和抗肿瘤药物等的载体 研究，尤其在抗肿瘤药物载体方向的研究已经取得了较深入的成果。 √pH 敏感脂质体 pH 敏感脂质体是基于肿瘤间质处的pH 值比正常组织低的特点而设 计的一种具有细胞内靶向和控制药物释放作用的脂质体。目前常用的PH 敏感脂质体为二油酰磷脂酰乙醇胺( DOPE )。 当脂质体处于中性pH 环境时,DOPE的羧基离子可提供有效静电进行 排斥,使脂质体保持稳定, 当pH改变时, 双层脂质体可转变成六角相, 引 发脂质体膜不稳定、聚集、融合、释放内容物。从而将包封物导入细胞 质并主动靶向到病变组织,提高药物的靶向性。 √免疫脂质体 脂质体的表面连接上抗体或受体，则可通过特异性结合作用，使脂 质体的移动具有靶向性，这样的脂质体叫做免疫脂质体。由于其具有运 载量大、靶向性强和毒副作用小等优点，也被学者研究来用于肿瘤靶向 治疗。 √磁性脂质体 磁性脂质体是在脂质体中掺入铁磁性物质制成, 在体外磁场的作用 下,把抗肿瘤药物选择性地输送和定位于靶细胞, 从而降低药量, 减少毒 性，提高疗效。 在交变磁场作用下, 到达靶区的磁场粒子能迅速升温至有效治疗温 度, 导致肿瘤组织坏死, 而无磁性脂质体的正常组织则不受损伤。 脂质体—制备 √实验原理 常见的磷脂分子结构中有两条较长的疏水烃链和一个亲水基团。将适量的磷脂加至水或缓冲溶液中，磷脂分子定向排列，其亲水基团面向两侧的水相，疏水的烃链彼此相对缔和为双分子层，构成脂质体。 用于制备脂质体的磷脂有天然磷脂，如大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂等；合成磷脂，如二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱等。常用的附加剂为胆固醇。胆固醇也是两亲性物质，与磷脂混合使用，可制得稳定的脂质体，其作用是调节双分子层的流动性，降低脂质体膜的通透性。 其他附加剂有十八胺、磷脂酸等，这些附加剂能改变脂质体表面的电荷性质，从而改变脂质体的包封率、体内外稳定性、体内分布等其他相关参数。 2.实验方法 在制备含药脂质体时，根据药物装载的机理不同，可分为“主动载 药”与“被动载药”两大类。 所谓“主动载药”，即通过脂质体内外水相的不同离子或化合物梯 度进行载药，主要有K+-Na+梯度和H+梯度(即pH梯度)等。 传统上，人们采用最多的方法是“被动载药”法。“被动载药”即 首先将药物溶于水相或有机相(脂溶性药物)中，然后按所选择的脂质体 制备方法制备含药脂质体。 对于脂溶性的、与磷脂膜亲和