肝癌肿瘤浸润淋巴细胞TIL体外扩增及特性研究-中国细胞生物学学报.PDF

网络出版时间：2014-07-01 16:21 网络出版地址：/kcms/doi/10.11844/cjcb.2014.07.0367.html 中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2014, 36(7): DOI: 10.11844/cj cb.2014.07.0367 临床细胞生物学 肝癌肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)体外扩增及特性研究 江珊珊 唐 艳 潘 科 翁德胜 赵靖靖 何 佳 夏建川* ( 中山大学附属肿瘤医院生物治疗中心, 广州 510060) 摘要 探讨从原发性肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)患者的术后肿瘤组织中分离肿瘤浸 润性淋巴细胞(tumor-infiltrating lymphocyte, TIL), 并进行体外大量扩增的方法。在该研究工作中, 组 织标本来源于术后的肿瘤癌旁组织, 经过组织破碎、酶消化后, 采用不连续密度梯度离心分离其中 淋巴细胞。分离的淋巴细胞先采用大剂量重组人白介素2(IL-2)(2 000 U/mL)进行引发, 然后采用同 种异体的外周血单核细胞作为饲养细胞进行扩增。针对9例原发性肝癌术后标本, 所分离的TIL均 9 能成功进行培养扩增, 扩增后细胞数为(1~5.5)×10 。扩增倍数为111~572。扩增后的TIL, 表型检测 发现CD3+ ± + + ± + + 细胞的比例为(90.3 9.4)%, CD3 CD4 细胞的比例为(24.9 14.1)%, CD3 CD8 细胞的比例为 (56.4±20.2)%, CD3+ + ± CD56 细胞的比例为(14.8 12.6)%。杀伤检测结果显示, 肝癌TIL对非自体肿瘤细 胞系HepG2和Bel-7402有较强的杀伤作用。因此, 采用该改良的方法, 原发性肝癌的TIL在体外可以 成功进行培养扩增, 并具有较强抗肿瘤活性, 可以作为肝癌术后巩固性免疫治疗的一种手段。 关键词 肝癌; 肿瘤浸润性淋巴细胞; 免疫治疗; 体外扩增培养 In Vitro Culturing and Characteristics of Tumor-infiltrating Lymphocyte of Hepatocellular Carcinoma Jiang Shanshan, Tang Yan, Pan Ke, Weng Desheng, Zhao Jingjing, He Jia, Xia Jianchuan* (Department of Biotherapy Center, Sun Yat-sen University Cancer Center, Guangzhou 510060, China) Abstract The aim was to investigate the methods of ex vivo expansion of tumor-infiltrating lympho- cyte (TIL)