本科毕业设计论文_公猪精液规范化采集与稀释.doc

公猪采精与稀释操作规程 -----四川安佑技术服务部（2012-09-14） 1、采精与精液处理流程（讲究卫生，控制温度） （1）采精过程流程1、? 2、? 35℃水浴锅中升温 3、? 38℃ 4、? 5、? 0.1％KMnO4溶液清洗其腹部及包皮，再用清水洗净，抹干。 、? 8、? 9、? 10、 11、 （2）精液处理操作流程1． 2．35℃的水浴锅中与稀释液等温。 3．10～25微升左右，滴在载物台上预热的载玻片上，盖上盖玻片，估测活力。精子活力大于0.6，则可用于下一步的处理。 4．1毫升精液放入加有10毫升生理盐水的精子密度杯中，读出读数后，在查对表上查到精子密度值。 5． 6．精液稀释后，检查精液活，若无明显下降，分装．置22-25℃的室温1小时后(或用几层毛巾包被好后)直接放置17冰箱中 9． 2、稀释液的配制过程? 2.1 配制过程 以1000毫升BTS稀释液为例，可用任一方法： ①经过清洗干燥消毒的三角瓶，将一袋BTS稀释粉（50克）全部加入瓶中，用量筒量取双蒸馏水1000毫升，加入三角瓶中。盖上盖子或用稀释粉袋套在三角瓶口上，封紧摇动，使稀释粉完全溶解。或放在磁力搅拌器上，搅拌加速溶解。取下盖子，放入35℃的水浴锅中预温。 稀释液用过后，三角瓶应用蒸馏水冲洗，空干水分，然后将三角瓶、量筒用牛皮纸封口，放入80～120℃的消毒柜或干燥箱中烘干。 ②将两个食品袋相套放入大烧杯中或塑料杯中，放在电子秤上，打开电子秤开关，当电子秤上读数为零时， 将连接蒸馏水容器的硅胶管放出少量水后，将管口对准杯口注水，并注意读数变化，当接近1000克时，应放慢流速，改为滴注，直到1000克。之后，应将蒸馏水管的龙头套好，防止污染。 在大烧杯中加入一袋稀释粉（50克）。 从盛磁珠的小烧杯中取镊子并夹取磁珠，在废液缸上用洗瓶冲洗磁珠2-3次， 待磁珠上水分滴净后，放入烧杯中，然后将烧杯放在磁力搅拌器上，打开电源开关和加热开关，调整磁珠转速旋扭，使磁珠以适当速度旋转（水体形成涡流），使稀释粉全部溶解后，降低磁珠转速，关闭加热和电源开关。 将杯子放入35℃的水浴中预温。 注：不能控温的加热磁力搅拌器使用时间不可超过10分钟，或及早关闭加热电源；平时磁珠放在一个清洗干燥过的小烧杯中，注入新鲜蒸馏水半杯，镊子为不锈钢材料，也经清洗干燥放入杯中，盖上干净的培养皿，每3周应换掉陈水，冲净换上新的蒸馏水。稀释液加入精液中后，应用小烧杯中的镊子将磁珠从大烧杯中夹出，并在废液缸上冲洗磁珠和镊子前端3-4遍，待磁珠上水分滴净后，连同镊子放入小烧杯中，盖上培养皿。 这种方法由于稀释液是在一次性食品袋中配制的，因此，不需要对配制稀释液的容器进行清洗和消毒，实现了稀释液配制的免消毒。 冬季稀释粉溶解较慢，可将稀释粉与水混合后，放入水浴锅中预温10分钟，再摇匀，可加速稀释粉溶解。使用加热磁力搅拌器者不必在水浴锅中预温。 注：除大规模人工授精站外，一般不主张自己配制稀释粉，推荐使用商业化稀释粉，这些产品质量稳定可靠。另外，稀释粉与蒸馏水按什么比例混合是十分严格的，应按照说明书上的配比进行稀释粉的溶解，不可改变配比。 2.2 PH值与渗透压 用1N稀盐酸或1N氢氧化钠调整BTS稀释液的PH值为7.2(6.8-7.4)左右,渗透压为330mOsm液态状稀释液冰箱4保存，不超过24小时，超过有效贮存期的变质稀释液应废弃采精前的准备 用保温杯作集精杯时，不能直接将精液采入杯中。将两层食品袋装入保温杯内，并用洁净的玻璃棒使其贴靠在保温杯壁上，袋口翻向保温杯外，上盖一层专用过滤网，用橡皮筋固定，并使过滤网中部下陷3厘米，以避免公猪射精过快或精液过滤慢时，精液外溢。安装好后，将其放恒温箱在37℃温度下备用。 如果是纸杯作集精杯，在杯口上固定上一次性过滤网，并使网面下陷2～3厘米， 如果没有恒温箱，可在安装集精杯之前，用电吹风机将集精杯内壁加热到温热状态（不可加热到烫手）。 采精前应将集精杯、消毒纸巾、一次性手套放入壁厨中，以方便采精时取用。 2．精液品质检查用品准备? 最好先将显微镜调好备用，把显微镜加热板放在显微镜载物台上，用标本夹固定好，打开电热板控制器电源开关，把设定温度调到38℃再打到测温状态，准备好两张洁净的载玻片和两张洁净的盖玻片放在加热板上预温。将电子秤、密度测定等用品准备好。 3． 公猪的准备 采精员将待采精的公猪赶至采精栏，关上采精区的栅栏门，并用毛刷刷拭假母猪的台面和后躯下；然后再清扫公猪两侧肋腹部及下腹部，必要时，可将公猪的阴毛剪短（留3厘米）。 4．采精员的准备 采精员应穿上工作服，将公猪赶入采精室后，清扫猪体后，应尽快右手戴上双层无毒的一次性手套，带上纸巾、集精杯、小凳准备采精。 4、采精技术一、采精的