植物样品总氮的测定.docVIP

植物样品中总氮的测定 高氯酸——硫酸消煮法 方法原理： 用H2SO4消煮样品以测定有机氮的方法，统称开氏法。植物样品在强氧化剂高氯酸的参与下，使有机氮分解转化成氨，然后与硫酸结合成硫酸氨【（NH4）2SO4】,最后浓碱蒸馏，将氨赶走，用硼酸吸收，以标准酸滴定，其反应如下： NH2-CH2COOH+6HCL4 = NH3+2CO2+3CL2+9O2+2H2O 2NH3+H2SO4 = (NH4)2SO4 (NH4)2SO4+2NaOH = Na2SO4+2NH3+2H2O H3BO3+NH3 = NH4CL+H3BO3 NH3—H3BO3+HCL = NH4CL+H3BO3 试剂和仪器： 试剂：浓H2SO4 、60%高氯酸、2%含混合指示剂的硼酸、40% NaOH、红色石蕊试纸、0.02N HCL(或0.02N H2SO4) 仪器：小漏斗、100ml开氏瓶、注射器、电炉、滴管、半微量开氏定氮装置、三角瓶 酸式半微量滴定管 实验步骤： 称样品 0.25＊＊g，于100ml开氏瓶中，放上小漏斗，用注射器（无针头）加入浓硫酸3ml，60%高氯酸8滴左右，在电炉上加热消化，温度不宜太高（一般电炉丝微红），消化10分钟。（消化时浓硫酸不能冒烟），如果样品变成白色或灰白色，则表示消化完全。如果样品仍为黑色或棕色，说明高氯酸用量不够，应把开氏瓶取下来冷却后，补加60%高氯酸数滴（6滴），加入量应视消化颜色的深浅而定，以免引起氨的损失，再在电炉上消化至样品成白色或灰色。 取下开氏瓶；用蒸馏水多次把开氏瓶内的消化液全部洗入100ml容量瓶中定容，冷却后摇匀备用。 吸取10ml用半微量定氮蒸馏法来测定重氮 吸取10ml（或15或20ml）定溶至50ml，用火焰光度计测钾 吸取10ml用钒钼黄比色法来测磷 蒸馏：吸取待测液10ml，通过③置于半微量蒸馏器中①，另备装有10ml 2%含混合试剂的硼酸吸收液的三角瓶放于冷凝管下端②，使冷凝管和液体相接触，以免吸收不完全，再从小漏斗③处加入40%NaOH溶液5ml，立即关紧③ ④ ⑤ 同时打开夹子⑥，使烧瓶蒸汽通入蒸馏瓶中，蒸馏约10分钟左右，用红色的石蕊试纸检验是否蒸馏完全。检验方法：取下接受瓶⑨，在冷凝管下端②处滴一滴馏液于试纸上，若试纸不变色，表明蒸馏完全，若试纸变成蓝色，表明蒸馏不完全，再继续蒸馏，直到蒸馏完全为止。 蒸馏完毕后，取下接收瓶⑨，打开④，关闭⑥，打开⑤，利用气压差原理，倒吸的方法，排除蒸馏瓶中的废液。 滴定：用0.02N HCL 或硫酸标准溶液装入微量滴定管中，滴定硼酸溶液吸收的氮，滴定过程中褐色变化由蓝绿经蓝紫突变为红紫即为滴定终点。 结果计算： 全氮量%=??N(V-V0) * 0.014 * 分取倍数/W(1-含水率) *100 0.014：为每毫克当量氮的重量（克） N 和V：标准酸的当量浓度和用量 VO : 空白试验中标准酸的用量 W ： 样品的重量（克） 五、注意事项 I、消化时温度不宜太高，否则高氯酸分解太快氧化过于剧烈易引起样品中氮的损失 II、当无高氯酸（分解或挥发完）时，硫酸发烟对测定结果无影响 混合指示剂：取50ml 0.1%的甲基蓝乙醇溶液于200ml的0.1%甲基红乙醇溶液充分混合后于棕色试剂瓶中保存备用 2%硼酸-指示剂：取2%硼酸溶液20ml，滴加2~3滴混合指示剂，摇匀后使溶液呈紫红色即可。 III、最后高氯酸的加入量不可过多，否则易把已经形成的硫酸铵分解，是结果偏低。