粤东地区丙型病毒性肝炎患者的HCV基因型分型研究——附140例检测分析.pdfVIP

新医学2012年2月第43卷第2期 论 著 粤东地区丙型病毒性肝炎患者的HCV基因型分型研究 — — 附140例检测分析 黄敬彬 柯楚琴 [摘 要] 目的：了解粤东地区丙型病毒性肝炎 (丙肝)患者HCV的基因型分型情况，为该 地区丙肝防治提供参考。方法：收集 140例粤东地区丙肝患者的血清标本，提取HCVRNA进行 core片段扩增及 DNA测序 ，并根据测序获得的core序列进行基因分型，分析不同感染途径、不 同年龄段丙肝患者的基因分型情况。结果：成功扩增 core片段 123例 (87．9％)，其中HCV1b 型78例 (63．4％)、HCV2a型 12例 (9．8％)、HCV3a型 6例 (4．9％) 、HCV3b型 5例 (4．1％)、HCV6a型22例 (17．9％)。HCV6a型主要流行于静脉药瘾者 中，HCV1b型则在非 静脉药瘾者中流行。HCVlb、3a／b型在不同年龄段患者均匀分布，HCV2a型则见于31岁以上 患者，HCV6a型主要见于2l一40岁患者。HCV2a型患者感染时间明显短于6a型 (P0．05)。 结论：粤东地区丙肝患者HCV基因分型常见 HCV1b型与6a型，其中HCV6a型主要见于有静 脉药瘾的年轻患者，HCV基因型分布正在因为传播途径的改变而变化。 [关键词] 丙型肝炎病毒；丙型病毒性肝炎；感染途径；基因分型；粤东地区 1 引 言 超过60岁 11例；感染途径为静脉药瘾 21例，输 丙型肝炎病毒 (HepatitisCvirus，HCV)为单 血或血制品65例，其他 (除静脉药瘾、输血外的 正链 RNA病毒，分为6个基因型和 11个亚型，基 传播途径，如手术、纹身等)11例，感染途径未 因型的分布具有明显地域性，我 国HCV的主要基 明26例。明确初始感染 HCV 日期患者 87例，感 因型为 1、2、3型 J。基因型的不同与病情的轻 染时间 (初始感染 日至2011年 12月31日)3—32 重、治疗效果有关 J。因此，探讨地区性 HCV基 年。 因分型对丙型病毒性肝炎 (丙肝)的预防和治疗 2．2 方 法 具有重要意义。粤东地区包括广东潮州、汕头、揭 2．2．1 HCVRNA提取及逆转录 抗病毒治疗前留 阳、汕尾、梅州市，主要是潮汕人的聚居地，在生 取患者外周静脉血5ml，分离血清，一70℃保存待 活习惯上明显不同于珠三角和粤北、粤西地区。本 用。取抗HCV阳性血清 140 l，采用美国OMEGA 研究拟采用直接测序方法检测粤东地区丙肝患者 病毒 RNA提取试剂盒，根据试剂盒说明书操作提 HCV样本的基因型，分析该地区的HCV基因型分 取HCV总 RNA。然后将抽提所得的RNA沉淀溶 布是否与传播模式存在关联，旨在为该地区丙肝防 于30 1焦碳酸二乙酯处理过的双蒸水，取 11Ixl 治提供参考。 RNA溶液使用 日本TOYOBO逆转录试剂盒进行逆 2 对象与方法 转录，具体操作严格按照说明书要求执行，采用随 2．1 研 究对象 机引物，总反应体系2O 1。 2007年 1月 一2010年 12月在我院住院的 140 2．2．2 Core片段扩增 采用巢式 PCR扩增 HCV 例丙肝患者，均为在粤东地区出生并长期居住者， Core区段，该区段长度405nt。Core外侧引物 (第 经检测血清抗一HCV抗体 阳性、HCV RNA 阳性 1轮)序歹U上游 5’．ACTGCCTGATAGGGTCCTFGC．